Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DR5/TRAILR2/TNFRSF10B para WB e ELISA - O14763

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B

• DR5/TRAILR2/TNFRSF10B é um membro da superfamília de receptores do fator de necrose tumoral, também conhecido como receptor de morte 5 (DR5), KILLER e TRAIL-R2. É codificado pelo gene TNFRSF10B no cromossomo 8p21.3.
• O receptor liga-se ao ligante citotóxico TNFSF10/TRAIL, desencadeando a apoptose por meio do recrutamento do adaptador FADD e da caspase-8 para formar o complexo de sinalização indutor de morte (DISC). Referências relacionadas: PMID:10549288
• Após a formação do DISC, a caspase-8 é ativada proteoliticamente, iniciando uma cascata de caspases que executam a apoptose. A sinalização mediada por DR5 também ativa o NF-kB, associando-a às vias de sobrevivência.
• DR5 é essencial para a apoptose induzida por estresse do retículo endoplasmático, destacando seu papel nas respostas celulares ao estresse.
• A proteína é uma glicoproteína transmembrana do tipo I localizada na membrana plasmática. Contém domínios extracelulares característicos ricos em cisteína e um domínio de morte citoplasmático.
• DR5 é amplamente expresso em tecidos adultos e fetais, com expressão particularmente elevada em linhagens celulares tumorais (por exemplo, HeLa, K-562, HL-60, SW480, A-549, G-361) e no coração, fígado, pâncreas, baço, timo, próstata, ovário, útero, placenta e trato intestinal; não é detectável no cérebro.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação e formação de pontes dissulfeto, que são essenciais para a estabilidade do receptor e a ligação ao ligante.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo policlonal corresponde aos aminoácidos 260-440 de DR5/TRAILR2/TNFRSF10B humano, abrangendo o domínio de morte intracelular e parte da região citoplasmática. Esse desenho pode ser adequado para detectar tanto as formas completas quanto as formas clivadas do receptor.
• Devido à especificidade para DR5 humano, os experimentadores devem validar a reatividade cruzada ao utilizar amostras não humanas; o produto foi confirmado para reatividade humana.
• Para Western blot (WB), linhagens celulares com alta expressão de DR5 (por exemplo, HeLa, K-562, SW480) podem servir como controles positivos, enquanto tecidos cerebrais podem apresentar resultado negativo. Considere utilizar condições adequadas de lise e redução para observar a banda de aproximadamente 48 kDa.
• As aplicações em ELISA podem exigir a otimização das condições de revestimento e do sistema de detecção devido à localização do receptor na membrana; a proteína DR5 recombinante ou lisados celulares podem ser avaliados como alvos de captura.
• Como DR5 sofre splicing alternativo e glicosilação, múltiplas bandas ou um esfregaço podem ser observados em algumas amostras. O uso de enzimas de desglicosilação ou a confirmação por knockdown com siRNA pode ajudar a validar a identidade da banda.

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