Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-DROSHA para WB, IF/ICC, ELISA - Q9NRR4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DROSHA

• DROSHA (Ribonuclease 3) é uma proteína nuclear também conhecida como RNASEN, RN3 ou RNase III, codificada pelo gene DROSHA. É membro da família de ribonucleases III de endorribonucleases específicas para RNA de fita dupla.
• Como subunidade catalítica do complexo microprocessador, a DROSHA processa transcritos primários de miRNA (pri-miRNAs) em miRNAs precursores de ~70 nucleotídeos (pre-miRNAs) no núcleo, iniciando a via canônica de biogênese de miRNA.
• Ela cliva tanto a fita 3' quanto a 5' da estrutura de alça-haste nos pri-miRNAs a uma distância definida da junção, liberando pre-miRNAs em forma de hairpin para processamento adicional pela DICER no citoplasma.
• Além da maturação de miRNA, a DROSHA participa do processamento de RNA pré-ribossômico e desempenha um papel na formação de corpos GW/P, ligando-a ao metabolismo de RNA e ao silenciamento gênico.
• Subcelularmente, a DROSHA se localiza predominantemente no núcleo, com enriquecimento no nucléolo, mas também pode ser detectada no citoplasma sob certas condições.
• A proteína é expressa de forma ubíqua e está sujeita a splicing alternativo e modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, que podem regular sua atividade.
• Palavras-chave associadas à DROSHA incluem: Endonuclease, Hidrolase, Ligação a RNA, Ligação a metais Magnésio/Manganês e silenciamento gênico mediado por RNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100). Para aplicações como Western blot, a proteína de comprimento completo migra em ~159 kDa; garanta uma transferência adequada e use marcadores de peso molecular apropriados.
• Para imunofluorescência/ICC, as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas, pois o alvo é predominantemente nuclear; considere usar uma contramarcação nuclear para confirmar a localização.
• O desempenho do ELISA pode ser verificado usando proteína DROSHA recombinante ou peptídeo sintético; recomenda-se a titulação do anticorpo.
• Verifique a reatividade no seu sistema de amostra específico derivado de humano, pois os níveis de expressão podem variar.

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