Anticorpo policlonal anti-distrofina para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P11532

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da distrofina

• A distrofina, codificada pelo gene DMD, é uma grande proteína do citoesqueleto produzida como múltiplas isoformas por meio de splicing alternativo e do uso de promotores alternativos.
• Ela atua como um componente central do complexo de glicoproteínas associado à distrofina (DGC), ancorando a matriz extracelular ao citoesqueleto intracelular de F-actina por meio da ligação à distroglicana; esse complexo é fundamental para estabilizar o sarcolema durante a contração muscular.
• O DGC concentra-se na junção neuromuscular (NMJ) e em diversas sinapses nos sistemas nervosos central e periférico, onde a distrofina auxilia na integridade estrutural e na transmissão sináptica.
• A distrofina está predominantemente localizada nas fibras musculares, nos costâmeros do sarcolema; ela também é expressa no cérebro, rim, pulmão e testículo, sendo a isoforma 15 encontrada exclusivamente no coração e no fígado.
• Subcelularmente, a distrofina está presente na membrana celular, no sarcolema e na membrana celular pós-sináptica, além de estar associada ao citoesqueleto, de acordo com suas funções na estabilidade da membrana e na transdução de sinais.
• A proteína contém regiões de ligação à actina, repetições semelhantes à espectrina, motivos de dedos de zinco e domínios de ligação ao cálcio, sofre fosforilação, e mutações no gene DMD causam as distrofias musculares de Duchenne/Becker e cardiomiopatia.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um segmento da distrofina (aminoácidos 346–635), representando uma região central conservada da proteína. Valide a reatividade do anticorpo com as isoformas expressas nos seus sistemas de amostra.
• Para Western blot, considere que a distrofina é excepcionalmente grande (~427 kDa). Frequentemente, são necessários tempos de transferência prolongados e sistemas de gel adequados para obter uma transferência eficiente para a membrana.
• Realize a validação padrão com controles positivos relevantes (por exemplo, lisados de músculo esquelético humano, de camundongo ou de rato) e controles negativos para confirmar a especificidade nas diferentes aplicações (WB, IF-P, IHC-P, ELISA).
• Nos protocolos baseados em imunofluorescência, certifique-se de que as etapas de permeabilização estejam otimizadas para a detecção dessa proteína predominantemente associada à membrana.

CamelBio: sua ponte de fornecimento completa

A CamelBio oferece a fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa acesso simplificado a matérias-primas de alta qualidade para IVD direcionadas a alvos neuromusculares e de distrofia muscular. Como parceira completa de fornecimento, oferecemos pares de anticorpos validados, anticorpos monoclonais e policlonais otimizados, reagentes auxiliares a granel e fornecimento personalizado de matérias-primas para alvos raros, viabilizando o desenvolvimento dos seus ensaios do conceito à clínica.