Anticorpo Policlonal Anti-E-Selectina/CD62E para WB, ELISA - Q00690

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da E-Selectina/CD62E

• A E-selectina (CD62E, ELAM-1, LECAM2) é uma glicoproteína de superfície celular codificada pelo gene Sele em camundongos. Pertence à família das selectinas de moléculas de adesão e funciona principalmente na vigilância imune e inflamação.
• Função principal: Media a adesão inicial e o rolamento de neutrófilos sanguíneos em células endoteliais ativadas por citocinas, interagindo com seu ligante PSGL-1 (SELPLG). Referências relacionadas: PMID:1375914
• Também pode contribuir para a morfogênese capilar, sugerindo um papel na angiogênese e formação de novos vasos sanguíneos.
• Predominantemente localizada na membrana celular como uma proteína transmembrana do tipo I; sua região extracelular pode ser liberada (shedding) após ativação.
• Os domínios estruturais incluem um domínio lectina do tipo C N-terminal, um domínio semelhante a EGF, múltiplas repetições Sushi (SCR/CCP), uma única hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática curta. A ligação do cálcio ao domínio lectina é essencial para o reconhecimento do ligante.
• Contém múltiplas ligações dissulfeto que estabilizam os domínios extracelulares e é extensivamente glicosilada.
• Juntamente com a L-selectina e a P-selectina, forma a família das selectinas, cada uma exibindo padrões de expressão e especificidade de ligante distintos, mas sobrepostos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal de coelho foi produzido contra uma proteína recombinante que abrange o domínio extracelular (aa 22-557) da E-selectina de camundongo; espera-se que reconheça tanto a forma integral ligada à membrana quanto o ectodomínio solúvel liberado.
• Para Western blot, uma banda em aproximadamente 66 kDa (peso molecular previsto ~66,7 kDa) deve ser observada; esteja ciente de que a glicosilação pode causar pequenas alterações na migração. A titulação tanto do anticorpo primário quanto do secundário é recomendada.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção de E-selectina recombinante ou endógena. Valide com controles positivos e negativos apropriados em seu sistema de ensaio.
• O produto é validado para reatividade com amostras de camundongo; a reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada.
• Como o imunógeno cobre a maior parte da região extracelular, pode ser adequado para detectar proteína desnaturada em condições redutoras; no entanto, aplicações dependentes da conformação nativa podem requerer otimização empírica.
• Considere usar uma solução de bloqueio com leite desnatado a 5% ou BSA para reduzir a ligação inespecífica, especialmente para Western blot de lisados de tecido.

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