Anticorpo policlonal anti-E2F1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q01094

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de E2F1

• E2F1 é um fator de transcrição que forma heterodímeros com proteínas DP para se ligar aos sítios de reconhecimento de E2F (5'-TTTC[CG]CGC-3') nos promotores-alvo. Referências relacionadas: PMID:10675335, PMID:12717439, PMID:17050006
• O complexo DRTF1/E2F regula a transição G1/S ao controlar a expressão de genes envolvidos na progressão do ciclo celular e na replicação do DNA. Referências relacionadas: PMID:10675335, PMID:12717439, PMID:17704056
• E2F1 interage com a proteína do retinoblastoma RB1 de maneira dependente do ciclo celular, modulando sua atividade transcricional. Referências relacionadas: PMID:10675335, PMID:12717439, PMID:17704056
• Atua como um regulador dual, promovendo tanto a proliferação celular quanto a apoptose dependente de TP53/p53. Referências relacionadas: PMID:8170954
• Ativa diretamente a transcrição de PEG10 e RRP1B e bloqueia a diferenciação de adipócitos ao reprimir a ligação de CEBPA aos promotores de seus genes-alvo. Referências relacionadas: PMID:17050006, PMID:18625225, PMID:28992046, PMID:20040599, PMID:20176812
• Localiza-se principalmente no núcleo.
• É modificada pós-traducionalmente por fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que regulam sua estabilidade e atividade.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O peso molecular previsto de E2F1 é de 47 kDa; para Western blot, considere utilizar uma porcentagem de gel e condições de bloqueio adequadas para essa faixa de tamanho.
• Para IF/ICC, a permeabilização nuclear eficaz é fundamental; otimize as etapas de fixação e permeabilização para garantir o acesso do anticorpo ao compartimento nuclear.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 200–301 de E2F1 humano; embora seja relatada reatividade cruzada com camundongo e rato, valide a especificidade da detecção na espécie e no tecido-alvo.
• Este anticorpo policlonal pode reconhecer múltiplas isoformas de E2F1; confirme os padrões de bandas utilizando controles apropriados e, se necessário, knockdown por siRNA.
• Para aplicações em ELISA, considere realizar uma titulação em tabuleiro de xadrez para determinar as concentrações ideais dos anticorpos de revestimento e de detecção.

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