Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-EARS2 para WB, ELISA - Q5JPH6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EARS2

• O EARS2 codifica a glutamil-tRNA sintetase mitocondrial não discriminatória (mtGluRS), que aminoacila exclusivamente tanto o tRNA(Glu) quanto o tRNA(Gln) com glutamato, uma etapa crítica para a tradução proteica mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:19805282
• A enzima opera por meio de um mecanismo dependente de ATP de duas etapas: o glutamato é primeiro ativado para Glu-AMP e depois transferido para a extremidade 3' dos tRNAs cognatos. Referências relacionadas: PMID:19805282
• O EARS2 pertence à família de aminoacil-tRNA sintetases classe I e contém domínios conservados para ligação de ATP, ligação de RNA e atividade de ligase.
• A proteína se localiza na matriz mitocondrial, direcionada por um peptídeo de trânsito N-terminal.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcrito, potencialmente regulando a função enzimática ou o direcionamento mitocondrial.
• A acetilação pós-traducional foi identificada e pode modular a atividade ou estabilidade.
• Mutações no EARS2 estão associadas a doenças mitocondriais primárias, incluindo a deficiência combinada de fosforilação oxidativa 12 (COXPD12).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 42–220, cobrindo uma região conservada provavelmente exposta em condições nativas e desnaturantes, tornando o anticorpo adequado para WB e ELISA.
• Para Western blot, considere carregar 20–30 µg de lisado enriquecido de mitocôndrias ou de célula inteira; espere uma banda próxima a 59 kDa. Valide em seu sistema de amostra, pois modificações pós-traducionais podem causar pequenos deslocamentos.
• O anticorpo reage de forma cruzada com o EARS2 de camundongo; ao usar tecidos ou células de camundongo, verifique a especificidade com controles apropriados (por exemplo, modelos de knockdown ou knockout).
• Para ELISA, otimize o antígeno de revestimento (proteína recombinante ou peptídeo) e a diluição do anticorpo; um formato de ELISA direto pode ser usado para avaliar o título do anticorpo e a afinidade de ligação.
• Armazene alíquotas a -20°C ou -80°C. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento para manter a atividade.

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