Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-EDEM2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9BV94

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EDEM2

• EDEM2 (C20orf31, C20orf49, bA4204.1) é uma proteína semelhante à alfa-manosidase 2 que intensifica a degradação no retículo endoplasmático.
• Ela desempenha um papel fundamental na via de degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD), reconhecendo e direcionando glicoproteínas mal dobradas para a degradação proteassomal de maneira dependente de N-glicanos. Referências relacionadas: PMID:15537790 PMID:25092655
• Propõe-se que a EDEM2 inicie a ERAD catalisando a primeira etapa de remoção de manose dos glicanos do substrato, convertendo Man9GlcNAc2 em Man8GlcNAc2. Referência relacionada: PMID:25092655
• Provavelmente se liga a regiões hidrofóbicas expostas em proteínas mal dobradas, facilitando sua retrotranslocação e degradação.
• A proteína está localizada no lúmen do retículo endoplasmático.
• A EDEM2 é expressa de forma ubíqua nos tecidos humanos, com maior expressão no intestino delgado e nos leucócitos do sangue periférico, e menor expressão no cérebro e no músculo esquelético.
• Está sujeita a splicing alternativo e participa da resposta a proteínas não dobradas.
• O peso molecular previsto da EDEM2 humana é de aproximadamente 65 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 399–578 da EDEM2 humana, uma região que pode conferir especificidade ao alvo; considere verificar com seus próprios controles.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 65 kDa; recomenda-se utilizar linhagens celulares como HeLa ou HEK293 como controles positivos, mas é recomendável validar no seu sistema de amostra específico.
• Na imunocitoquímica (IF/ICC), as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para proteínas luminais do retículo endoplasmático; os testes iniciais com células conhecidamente expressoras de EDEM2 podem ajudar a estabelecer o protocolo.
• As aplicações de ELISA podem ser desenvolvidas utilizando proteína EDEM2 recombinante ou ensaios baseados em células; faça uma titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com EDEM2 de camundongo, permitindo seu uso em estudos com modelos murinos; no entanto, confirme sempre a reatividade com lisados de tecidos de camundongo apropriados.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; inclua controles positivos e negativos em cada experimento.

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