Anticorpo Policlonal Anti-EDN1 (Validado por KO) para WB, IF/ICC, ELISA - P05305

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Endotelina-1

• A Endotelina-1 é codificada pelo gene EDN1 e produzida como uma pré-proteína (PPET1) que sofre processamento proteolítico para produzir o peptídeo vasoativo maduro de 21 aminoácidos.
• Pertence à família das endotelininas, que são potentes vasoconstritores principalmente secretados pelas células endoteliais.
• A Endotelina-1 atua como um ligando para os recetores acoplados à proteína G EDNRA e EDNRB, levando à ativação de PTK2B, BCAR1, BCAR3 e GTPases RAP1 e RHOA em células mesangiais glomerulares. Referências relacionadas: PMID:19086031
• Também se liga ao recetor DEAR/FBXW7-AS1. Referências relacionadas: PMID:17446437
• Por similaridade, a endotelina-1 promove a remodelação da parede arterial mesentérica através da sinalização ROCK, levando à translocação nuclear de NFATC3 e à regulação positiva de ACTA2, um marcador de hipertrofia do músculo liso.
• Localização subcelular: Secretada para o espaço extracelular.
• Especificidade tecidual: Expressa no pulmão, vasos das vilosidades coriónicas placentárias e células do músculo liso vascular placentário cultivadas.
• Palavras-chave: Vasoativo, vasoconstritor, ligação dissulfeto, secretado, peptídeo sinal e variante da doença.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde aos aminoácidos 18-212 da EDN1 humana, cobrindo a região da pré-proteína. O anticorpo pode reconhecer tanto a forma precursora como a madura; considere isto ao analisar bandas no Western blot.
• O peso molecular previsto da pré-proteína é de 24 kDa; a endotelina-1 madura é de aproximadamente 2,5 kDa. Otimize a percentagem do gel e as condições de transferência para pequenos peptídeos, se necessário.
• Para IF/ICC, valide as condições de permeabilização e fixação, uma vez que a endotelina-1 é secretada; considere a coloração simultânea com marcadores de organelos.
• Ao utilizar para ELISA, emparelhe com um anticorpo de deteção adequado e valide na matriz de amostra relevante (por exemplo, soro, plasma) para evitar interferências.
• Foi relatada reatividade cruzada com rato e camundongo; verifique a especificidade no seu sistema experimental.

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