Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-EEA1 para WB, ELISA - Q15075

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Antígeno 1 de Endossomo Precoce

• O antígeno 1 de endossomo precoce (EEA1), também conhecido como proteína associada a endossomo p162 ou proteína 2 contendo o domínio de dedo de zinco FYVE (ZFYVE2), é uma proteína de membrana periférica envolvida no tráfego endossomal.
• O EEA1 liga-se especificamente a vesículas de fosfolipídios enriquecidas com fosfatidilinositol 3-fosfato (PtdIns(3)P), facilitando a fusão e o tráfego de endossomos precoces.
• A proteína contém um domínio de dedo de zinco FYVE terminal C que o direciona para as membranas de endossomos precoces, juntamente com domínios extensos de hélice alfa (coiled-coil) que medeiam a dimerização e a interação com outros reguladores endocíticos.
• Está predominantemente localizado na face citoplasmática das membranas de endossomos precoces, mas também pode ser detectado no citosol.
• Estudos funcionais mostram que o EEA1 participa na ancoragem e fusão de endossomos dependentes de Rab5, essencial para a progressão adequada da via endocítica.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, e características estruturais como motivos hélice alfa (coiled-coil) e o motivo de ligação de calmodulina IQ contribuem para seus papéis regulatórios.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região terminal N (aa 1-100) do EEA1 humano, que é altamente conservado em camundongo e rato, apoiando a reatividade cruzada observada.
• Para análise de Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 162 kDa; considere o uso de um gel SDS-PAGE de 6-8% e condições redutoras padrão.
• O anticorpo foi validado pelo fornecedor para WB e ELISA; para outras aplicações como imunofluorescência ou imunoprecipitação, a otimização é recomendada.
• Como o EEA1 está associado à membrana, considere incluir detergentes suaves nos tampões de lise para melhorar a solubilidade do antígeno e a detecção.
• Valide a especificidade do anticorpo na sua espécie alvo (humano, camundongo, rato) com controles positivos e negativos apropriados.

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