Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-EEA1 para WB, IHC-P, ELISA - Q15075

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EEA1

• EEA1 (antígeno 1 do endossomo inicial), também denominada proteína p162 associada ao endossomo ou ZFYVE2, é uma proteína de aproximadamente 162 kDa codificada pelo gene EEA1 em humanos.
• Funciona como um fator de ancoragem ao se ligar ao fosfatidilinositol 3-fosfato (PtdIns(3)P) nas membranas endossomais, facilitando o acoplamento e a fusão de vesículas durante o tráfego pelos endossomos iniciais.
• A proteína está predominantemente localizada na face citoplasmática das membranas dos endossomos iniciais e também está presente no citosol, em conformidade com seu papel na dinâmica das membranas.
• A EEA1 contém um dedo de zinco C2H2 N-terminal, extensos domínios de hélice enrolada e um domínio de dedo de zinco FYVE C-terminal, que medeia diretamente a ligação ao PtdIns(3)P.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, e a proteína está sujeita à identificação por proteômica, indicando ampla expressão em diferentes tecidos.
• Palavras-chave: estrutura 3D, hélice enrolada, citoplasma, sequenciamento direto de proteínas, endossomo, membrana, ligação a metais, fosfoproteína, identificação por proteômica, proteoma de referência, zinco, dedo de zinco.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1182–1411 da EEA1 humana, cobrindo a região C-terminal que inclui o domínio FYVE. Isso pode contribuir para o reconhecimento específico da proteína de comprimento completo.
• Para Western blot, espera-se uma banda principal próxima de 162 kDa. Use géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem e tempos de transferência prolongados para melhorar a detecção desse alvo de alto peso molecular.
• Em experimentos de IHC-P, as condições de recuperação antigênica devem ser otimizadas para cada tipo de tecido, e recomenda-se o uso de controles positivos e negativos apropriados.
• Para aplicações de ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção após a validação com EEA1 recombinante ou lisados celulares.

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