Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-eEF2 para WB e ELISA - P13639

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eEF2

• eEF2 (Fator de Alongamento 2) é uma GTPase chave que impulsiona a translocação ribossômica durante o alongamento da síntese proteica. Referências relacionadas: PMID:26593721
• Ele catalisa o movimento coordenado de moléculas de tRNA e mRNA através do ribossomo, fazendo a transição do estado pré-translocacional para o pós-translocacional.
• O eEF2 é codificado pelo gene EEF2, e mutações estão ligadas à ataxia espinocerebelar 26 (SCA26), um distúrbio neurodegenerativo.
• A proteína é predominantemente citoplasmática, mas também pode se localizar no núcleo, sugerindo possíveis funções extrarribossomais.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação, ADP-ribosilação, metilação e ubiquitinação, que regulam sua atividade.
• É membro da família dos fatores de alongamento de ligação a GTP e um componente essencial da maquinaria de biossíntese proteica.
• Seu peso molecular é aproximadamente 95 kDa (valor previsto de 95.338 Da a partir da sequência).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–290) do eEF2 humano; considere essa região para mapeamento de epitopo ou em ensaios competitivos.
• Para Western blot, use lisados totais de células ou tecidos; o eEF2 é abundante, então uma carga padrão (ex: 20–30 µg) pode ser suficiente. Otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para o seu sistema.
• Em ELISA, reveste com eEF2 recombinante ou peptídeo e realize a titulação em tabuleiro para determinar as concentrações ideais de revestimento e anticorpo.
• Valide a reatividade cruzada com amostras humanas; a reatividade com outras espécies não foi testada, então verifique empiricamente se estiver usando amostras não humanas.
• Como o eEF2 está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, deslocamentos de banda ou múltiplas bandas podem aparecer em certas condições; a desfosforilação ou inibidores específicos podem ser usados para identificar as formas modificadas.

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