Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-EFNA1 para WB, IHC-P, ELISA - P20827

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EFNA1

• A EFNA1 codifica a efrina-A1, um ligante de superfície celular ancorado em glicosilfosfatidilinositol (GPI) da família de receptores de tirosina quinase Eph. Também é conhecida como LERK-1, B61 e proteína 4 induzida por TNF alfa.
• A efrina-A1 liga-se promiscuamente aos receptores Eph em células adjacentes, mediando sinalização bidirecional dependente de contato que regula a migração, repulsão e adesão celular durante o desenvolvimento neuronal, vascular e epitelial. Referências relacionadas: PMID:17332925 PMID:18794797
• Na biologia vascular, a efrina-A1 desempenha um papel crítico na angiogênese, ativando o EPHA2 para promover a diferenciação e migração de células endoteliais.
• Como ligante para o EPHA3, a efrina-A1 inibe a transição epitélio-mesenquimal em células cardíacas, contribuindo para o desenvolvimento adequado do coração. Referências relacionadas: PMID:12794130
• A efrina-A1 também pode participar da morfogênese de espinhas dendríticas (por similaridade).
• A proteína localiza-se predominantemente na membrana celular através de uma âncora GPI, mas pode ser liberada como uma forma solúvel por clivagem. É abundantemente expressa no cérebro, e sua expressão é frequentemente regulada negativamente no glioma primário. A efrina-A1 monomérica solúvel foi detectada em células de glioblastoma e câncer de mama.
• As modificações pós-traducionais incluem a formação de ligações dissulfeto e glicosilação N-ligada. A proteína sofre splicing alternativo, gerando isoformas ligadas à membrana e secretadas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 19-182 da EFNA1 humana, cobrindo o domínio extracelular de ligação ao receptor. O anticorpo policlonal resultante pode reconhecer tanto as isoformas completas ancoradas em GPI quanto as solúveis.
• Para Western blot, os usuários podem testar diluições de anticorpo na faixa comumente usada para anticorpos policlonais (por exemplo, 1:500–1:2000) e confirmar a especificidade usando lisados de linhagens celulares com superexpressão e knockdown de EFNA1. A EFNA1 endógena migra aproximadamente a 24 kDa.
• Para IHC-P, considere otimizar a recuperação antigênica e incluir controles de tecido apropriados. Tanto seções de tecido humano quanto de rato embebidas em parafina podem ser usadas, dada a reatividade cruzada declarada.
• No ELISA, o anticorpo pode ser empregado como um reagente de captura ou detecção; a concentração de trabalho ideal deve ser determinada experimentalmente no formato de ensaio específico.
• Devido à natureza ancorada em GPI e ao possível "shedding" (liberação) da efrina-A1, a detectabilidade pode variar entre tipos celulares e condições de tratamento; a validação no sistema de amostra relevante é aconselhada.

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