Anti-EGFR (L858R) Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• O EGFR é um membro proto-oncogênico da família ErbB de receptores tirosina quinases, também conhecido como HER1 ou ErbB-1.
• Liga-se a uma variedade de ligantes semelhantes ao EGF (por exemplo, EGF, TGF-alfa, HB-EGF), levando à dimerização do receptor, autofosforilação e ativação de grandes cascatas de sinalização, incluindo RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC e STATs. Referências relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Ativa a cascata de sinalização NF-kappa-B. Referências relacionadas: PMID:11116146
• Fosforila diretamente RGS16 e MUC1, acoplando a sinalização do EGFR às vias de sinalização de proteínas G e beta-catenina, respectivamente. Referências relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589
• Regula a migração celular através da interação com CCDC88A/GIV, que retém o EGFR na membrana celular e promove a sinalização. Referências relacionadas: PMID:20462955
• A isoforma 2 pode atuar como um antagonista da ação do EGF.
• Localiza-se predominantemente na membrana celular, mas também é encontrado no retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, núcleo, endossomos e forma secretada.
• Expresso ubíquo; a isoforma 2 também é detectada em cânceres de ovário.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos aminoácidos 800–900 do EGFR contendo a mutação L858R; confirme a especificidade para o mutante comparando a reatividade contra o EGFR do tipo selvagem.
• Para Western blot, use condições desnaturantes e redutoras; espere uma banda próxima de 134 kDa. Valide usando lisados celulares expressando EGFR L858R e controles do tipo selvagem.
• Para IHC-P, otimize a recuperação de antígenio e inclua tecido conhecido por abrigar a mutação L858R (por exemplo, adenocarcinoma pulmonar) como controle positivo.
• Para ELISA, considere usar o peptídeo de imunização ou a proteína recombinante EGFR L858R como padrão, e avalie a potencial reatividade cruzada com o EGFR do tipo selvagem.

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