Anticorpo Monoclonal Anti-EGFR para WB, IF-P, ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• O receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) é um receptor tirosina quinase pertencente à família ErbB, também conhecido como ERBB1/HER1. Ele se liga a múltiplos ligantes da família EGF, incluindo EGF, TGF-α e HB-EGF, levando à dimerização do receptor e autofosforilação em resíduos de tirosina citoplasmáticos.
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• Após a ativação, o EGFR desencadeia várias cascatas de sinalização intracelular importantes: módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STAT, regulando assim a proliferação, sobrevivência, migração e diferenciação celular. Ele também ativa a sinalização NF-κB e pode fosforilar diretamente outros alvos, como RGS16 e MUC1.
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• A localização subcelular é predominantemente na membrana celular; no entanto, o EGFR também pode ser encontrado no retículo endoplasmático, complexo de Golgi, endossomos e núcleo, e existe uma isoforma secretada.

• O EGFR é uma glicoproteína fortemente modificada com um peso molecular calculado de 134 kDa, apresentando PTMs (modificações pós-traducionais) importantes, incluindo fosforilação, ubiquitinação, lipidação e pontes dissulfeto.

• O receptor é expressado ubiquamente em tecidos humanos, e uma isoforma 2 de splicing alternativo, que pode atuar como antagonista, também é detectada em cânceres de ovário.

• Além de seus papéis fisiológicos normais, o EGFR serve como um receptor de célula hospedeira para a entrada do vírus da hepatite C (HCV), mediando a formação do complexo CD81-CLDN1 e aumentando a fusão vírus-membrana celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 335–525) do EGFR humano; considere sua conservação entre espécies ao projetar experimentos para amostras de camundongo e rato.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 134 kDa; use uma porcentagem de gel apropriada e otimize as condições de transferência para proteínas grandes.
• Em imunofluorescência em cortes de parafina (IF-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária; valide a coloração em tecidos de controle positivo, como pele ou pulmão.
• Para ELISA, teste o anticorpo como reagente de captura ou detecção após confirmar a compatibilidade com o seu formato de ensaio específico.

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