Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-EGFR (Fosfo Y1068) para WB e ELISA - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• EGFR é uma tirosina quinase receptora que se liga a ligantes da família EGF, desencadeando dimerização do receptor e autofosforilação em resíduos citoplasmáticos-chave, incluindo Y1068, para ativar a sinalização a jusante (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960). Referências relacionadas: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• O receptor fosforilado recruta proteínas adaptadoras como GRB2, levando à ativação de pelo menos quatro cascatas de sinalização principais: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e módulos STAT (PubMed:27153536). Referências relacionadas: PMID:27153536
• EGFR fosforila diretamente outras proteínas, incluindo RGS16 e MUC1, ligando a sinalização EGF à sinalização GPCR e vias de adesão celular (PubMed:11602604, PubMed:11483589). Além disso, pode ativar a cascata de sinalização NF-kappa-B (PubMed:11116146). Referências relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:11116146
• A interação com CCDC88A/GIV retém o EGFR na membrana celular, promovendo a migração celular (PubMed:20462955). Referências relacionadas: PMID:20462955
• Subcelularmente, o EGFR é localizado na membrana celular, retículo endoplasmático, aparelho de Golgi, núcleo, endossomos e pode ser secretado. Esta distribuição dinâmica suporta seus papéis de sinalização multifacetados.
• Expresso de forma ubíqua, com a isoforma 2 também detectada em cânceres ovarianos. O EGFR também funciona como um receptor hospedeiro para a entrada do vírus da hepatite C (HCV) em hepatócitos.
• Modificações pós-traducionais-chave incluem fosforilação (especialmente em Y1068 após ligação do ligante), glicosilação, ubiquitinação e palmitoilação, essenciais para sua atividade quinase e duração da sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente à região Y1068; para WB, garanta a inclusão de inibidores de fosfatase em tampões de lise para preservar a fosforilação.
• Para ELISA, o recobrimento com o antígeno peptídico fosforilado pode ajudar a avaliar a especificidade do anticorpo; um peptídeo não fosforilado pode servir como controle negativo.
• Este anticorpo demonstrou reatividade cruzada com EGFR humano e de camundongo, portanto pode ser aplicado a estudos em ambas as espécies; no entanto, a validação no sistema de amostra alvo é recomendada.
• Considere usar um controle de carga que não seja afetado pelo estado de fosforilação para normalizar os sinais de WB.
• Dado o peso molecular de 134 kDa, ajuste a porcentagem do gel e as condições de transferência adequadamente.

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