Anticorpo policlonal de coelho anti-Egr4 para WB, ELISA - Q05215

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de Egr4

• Egr4, também conhecido como AT133, é um membro da família de fatores de transcrição com dedos de zinco da resposta de crescimento precoce (EGR).
• Funciona como regulador transcricional ao se ligar à sequência específica de DNA 5'-GCGGGGGCG-3' (GSG), ativando genes-alvo envolvidos na mitogênese e na diferenciação (por similaridade).
• Egr4 contém domínios de dedos de zinco do tipo C2H2, que facilitam a ligação ao DNA e são característicos dessa família de fatores de transcrição.
• Está predominantemente localizado no núcleo, em consonância com seu papel na regulação transcricional.
• Modificações pós-traducionais e interações proteicas podem modular sua atividade, conforme sugerido por suas propriedades de ligação ao zinco e ao DNA.
• Egr4 está implicado em processos celulares como respostas a fatores de crescimento, sendo que os nomes alternativos NGFIC (proteína C induzida pelo fator de crescimento nervoso) indicam sua indução por sinais de crescimento.
• As palavras-chave associadas a Egr4 incluem ligação ao DNA, ligação a metais, núcleo, transcrição e regulação da transcrição, destacando seu papel central no controle da expressão gênica.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante que abrange o Egr4 de camundongo em comprimento total (resíduos 1-367), podendo gerar anticorpos que reconhecem tanto as formas nativas quanto as desnaturadas da proteína.
• Para Western blot (WB), considere utilizar controles apropriados e validar a especificidade do anticorpo com peptídeos bloqueadores ou amostras submetidas a knockdown, pois Egr4 pode ter membros da família estreitamente relacionados (por exemplo, Egr1, Egr2 e Egr3).
• Ao realizar ELISA, assegure a otimização do antígeno de revestimento e da diluição do anticorpo para obter uma relação sinal-ruído ideal, pois os anticorpos policlonais podem apresentar variabilidade entre lotes.
• Considerando o peso molecular previsto de aproximadamente 62 kDa (Egr4 de camundongo), confirme a especificidade da banda no WB comparando-a com marcadores de peso molecular conhecidos e, possivelmente, utilizando lisados de controle positivo de tecidos de camundongo que expressem Egr4.
• Observe que o anticorpo foi validado para reatividade com camundongo; a reatividade cruzada com outras espécies (por exemplo, humano e rato) pode exigir verificação experimental.

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