Anticorpo Monoclonal Anti-EHHADH para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q08426

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EHHADH

• Codificada pelo gene EHHADH, a enzima bifuncional peroxissomal (também conhecida como proteína L-bifuncional, MFE1) é uma enzima trifuncional essencial para a β-oxidação peroxissomal de ácidos graxos de cadeia longa e ramificada.
• Possui atividades de 2-enoyl-CoA hidratase, 3-hidroxiacil-CoA desidrogenase e delta3-delta2-enoyl-CoA isomerase, catalisando duas das quatro reações da via (Por similaridade).
• Juntamente com HSD17B4, catalisa a hidratação do trans-2-enoyl-CoA e a desidrogenação do 3-hidroxiacil-CoA com especificidade quiral oposta, contribuindo para a degradação de ácidos dicarboxílicos (PubMed:15060085).
  Referências relacionadas:
  PMID:15060085
• Também é capaz de isomerizar tanto as ligações duplas 3-cis quanto 3-trans para a forma 2-trans em uma variedade de espécies de enoyl-CoA, apresentando atividade isomerase ótima para ligações duplas 2,5 (Por similaridade).
• Se localiza exclusivamente no peroxissomo, refletindo seu papel no metabolismo lipídico peroxissomal.
• É expressa predominantemente no fígado e rim, com forte expressão nos segmentos terminais do túbulo proximal; quantidades menores são encontradas no cérebro.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Atua como regulador chave dos níveis de ácidos graxos dicarboxílicos de cadeia média, influenciando todas as vias de oxidação de ácidos graxos (Por similaridade).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 110-284 dentro do domínio de hidratase; o anticorpo pode reconhecer tanto a proteína de comprimento completo quanto as isoformas.
• Para Western blotting, use lisados totais de células de fígado ou rim humano, ou de linhas celulares com expressão confirmada de EHHADH; uma banda de aproximadamente 79 kDa é esperada.
• Em imuno-histoquímica (parafina), considere a recuperação de antígeno induzida por calor e espere um padrão de coloração pontual específico de peroxissomos.
• Para imunofluorescência, a permeabilização é necessária para visualizar a localização peroxissomal; a co-coloração com marcadores peroxissomais pode confirmar a especificidade.
• Valide o desempenho do anticorpo na sua matriz de amostra específica e otimize as diluições experimentalmente, pois os padrões de coloração recomendados podem variar conforme a fixação e o processamento.

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