Anticorpo Policlonal Anti-EIF1AX para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P47813

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EIF1AX

• EIF1AX é o gene humano do cromossomo X que codifica o fator de iniciação da tradução eucariótica 1A, também conhecido como eIF-4C.
• Funciona como um componente do complexo de pré-iniciação 43S (43S PIC) que se liga ao mRNA e varre o UTR 5' para localizar o códon de início. Juntamente com o EIF1, facilita a varredura do mRNA, o reconhecimento do códon de início e promove a montagem do complexo de iniciação 48S, enquanto também dissocia complexos aberrantes. Referências relacionadas: PMID:9732867
• Após a localização do códon de início, coopera com o EIF5B para orientar o tRNA iniciador de metionina para a junção da subunidade ribossomal 60S, formando o complexo de iniciação 80S. Sua parte globular reside no sítio A da subunidade 40S. Referências relacionadas: PMID:35732735
• Liberado do ribossomo após a formação do complexo 80S, seguindo a hidrólise de GTP pelo EIF5B, antes da liberação do EIF5B. Referências relacionadas: PMID:35732735
• A interação com o EIF5 durante a varredura ajuda a manter o EIF1 dentro do 43S PIC aberto; no entanto, ao contrário dos ortólogos de levedura, o EIF1AX humano não se liga diretamente ao EIF1. Referências relacionadas: PMID:24319994
• Localiza-se no citoplasma, consistente com seu papel na iniciação da tradução.
• Palavras-chave incluem: fator de iniciação, biossíntese de proteínas, ligação a RNA, ligação a tRNA e interação hospedeiro-vírus.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 10-144 do EIF1AX humano, uma região altamente conservada entre espécies; considere testar a reatividade cruzada com outros mamíferos, se necessário.
• Para Western blot, recomenda-se um gel de SDS-PAGE a 15% devido ao baixo peso molecular (~16 kDa). Use controles de carga apropriados e verifique a especificidade da banda com amostras de knockdown ou knockout.
• No IHC-P, a recuperação antigênica pode ser necessária; otimize as condições de fixação e recuperação para o seu tipo de tecido. Inclua controles positivos e negativos.
• Para IF/ICC, a permeabilização é crítica para alvos nucleares/citoplasmáticos. Use 0,1-0,3% de Triton X-100 e valide o anticorpo no seu sistema celular.
• Foi relatado que o anticorpo reconhece EIF1AX em humanos, camundongos e ratos; no entanto, sempre valide o anticorpo na espécie e contexto experimental relevantes.

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