Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-EIF2AK1 para WB, ELISA - Q9BQI3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EIF2AK1

• O EIF2AK1, também conhecido como inibidor regulado por heme (HRI) ou repressor controlado por heme (HCR), é uma serina/treonina cinase sensora de estresse metabólico que fosforila a subunidade α do fator de iniciação da tradução eucariótica 2 (eIF-2α) na serina 51. Esta fosforilação converte o eIF-2α num inibidor global da síntese proteica, atenuando assim a tradução dependente de cap 5' e iniciando a resposta integrada ao estresse (ISR).
  Referências relacionadas: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776

• Como um sensor de heme, o EIF2AK1 liga-se à hemina através de uma coordenação de tiolato de cisteína e nitrogênio de histidina com afinidade moderada, mantendo a cinase inativa em condições normais. A depleção de heme, como durante a deficiência de ferro, liberta esta inibição, desencadeando a ativação da ISR e desempenhando um papel crucial na coordenação da síntese de hemoglobina nos glóbulos vermelhos.

• Após a disfunção mitocondrial, a forma processada do DELE1 (S-DELE1) liga-se e ativa diretamente o EIF2AK1, levando a uma reprogramação transcricional mediada por ATF4. Esta via também promove a mitofagia independente de PRKN através da fosforilação do eIF-2α em mitocôndrias danificadas.
  Referências relacionadas: PMID:32132706, PMID:32132707, PMID:37327776, PMID:38340717

• O gene EIF2AK1 sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas proteicas. A proteína é modificada pós-traducionalmente por fosforilação e conjugação semelhante à ubiquitina, conforme indicado por estudos de fosfoproteómica e proteómica.

• A localização subcelular não é explicitamente descrita no registo atual da UniProt; no entanto, todos os substratos conhecidos e parceiros funcionais se localizam no citoplasma, consistente com o seu papel na regulação da tradução.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunogénio corresponde aos resíduos 337-586 do EIF2AK1 humano, que abrange uma grande parte do domínio da cinase, este anticorpo é provável que reconheça tanto as isoformas de comprimento total como as truncadas, onde esta região é preservada. Para Western blot (WB), considere otimizar a preparação de lisados com inibidores de fosfatases e validar a deteção em linhagens celulares com expressão confirmada de EIF2AK1.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção; o emparelhamento com um clone diferente ou um anticorpo de deteção policlonal pode melhorar a sensibilidade do ensaio. Valide o ensaio na matriz de amostras relevante.
• Dada a designação [KD Validado], o anticorpo foi testado em amostras de knockdown; realizar um WB comparativo com células tratadas com siRNA versus não tratadas pode confirmar ainda mais a especificidade no seu sistema.

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