Anticorpo Monoclonal Anti-eIF2C3 para WB, IHC-P, ELISA - Q9H9G7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF2C3/Argonaute-3

• O eIF2C3, também conhecido como Argonaute-3 (Ago3) ou Fator de iniciação da tradução eucariótica 2C 3, é um componente central do complexo de silenciamento induzido por RNA (RISC) envolvido no silenciamento gênico pós-transcricional.
• Ele se liga a RNAs curtos, como miRNAs, e reprime a tradução de mRNAs complementares. Em células-tronco, foi proposto que ele estabiliza siRNAs derivados de repetições de Alu e facilita a degradação de um subconjunto de mRNAs codificadores, recrutando o complexo de remoção da capa do mRNA via EDC4.
• O eIF2C3 possui atividade de "slicer" de RNA (endonucleolítica), mas é altamente seletivo, clivando apenas RNAs com sequências flanqueadoras 5' e 3' específicas em relação à região de complementaridade guia-alvo (PubMed:29040713). Referências relacionadas: PMID:29040713
• A proteína se localiza no citoplasma e está concentrada em corpos P, grânulos citoplasmáticos envolvidos no armazenamento e degradação de mRNA.
• O eIF2C3 sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação do tipo ubiquitina, que podem regular sua estabilidade e atividade.
• O gene AGO3 sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas que podem ter funções ou padrões de expressão distintos.
• Ele é classificado sob várias palavras-chave funcionais: é uma proteína de ligação a RNA, endonuclease, hidrolase, proteína de ligação a metais e ribonucleoproteína, destacando seus papéis catalíticos e estruturais no silenciamento por RNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 721-860) do eIF2C3 humano, que faz parte do domínio PIWI; este domínio é crítico para a atividade endonucleolítica e ligação ao RNA guia. Os pesquisadores devem confirmar que o epítopo está acessível em suas condições experimentais.
• Para Western blotting (WB), espere uma banda em aproximadamente 97 kDa. Otimize o preparo da amostra com condições adequadas de lise e redução, e inclua controles positivos (por exemplo, HeLa) e negativos (por exemplo, knockout) para verificar a especificidade.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere métodos padrão de recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0) e valide a marcação comparando com os padrões de expressão conhecidos do eIF2C3 ou usando secções de tecido tratadas com siRNA.
• Em aplicações de ELISA, garanta o recobrimento adequado da proteína ou peptídeo recombinante e teste em uma faixa de concentrações de anticorpo para determinar a sensibilidade e especificidade ótimas.

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