Anticorpo policlonal anti-EIF3A para WB, IF/ICC, ELISA - Q14152

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da EIF3A

• A EIF3A é um componente de ligação ao RNA do complexo do fator de iniciação da tradução eucariótica 3 (eIF-3), necessário para várias etapas do início da síntese proteica. Referências relacionadas: PMID:17581632, PMID:25849773
• O complexo eIF-3, que contém EIF3A, facilita o recrutamento de eIF-1, eIF-1A, eIF-2:GTP:Met-tRNAi e eIF-5 para o ribossomo 40S, formando o complexo de pré-iniciação 43S (43S PIC). Referências relacionadas: PMID:17581632, PMID:25849773
• A EIF3A estimula o recrutamento de mRNA para o 43S PIC e a varredura para o reconhecimento de AUG; também é necessária para a desmontagem e a reciclagem dos complexos ribossômicos pós-terminação, impedindo a associação prematura das subunidades 40S e 60S. Referências relacionadas: PMID:11169732, PMID:17581632
• Essa subunidade direciona especificamente e inicia a tradução de um subconjunto de mRNAs envolvidos na proliferação, diferenciação e apoptose celular, utilizando diferentes modos de ligação a estruturas em grampo do RNA para promover ativação ou repressão translacional. Referências relacionadas: PMID:25849773, PMID:27462815
• Durante infecções microbianas, a EIF3A é essencial para a iniciação em sítios internos de entrada no ribossomo (IRESs) virais do tipo 1, como os do HCV, PV, EV71 ou BEV, e desempenha um papel no evento de terminação-reiniciação ribossômica durante a tradução de FCV VP2. Referências relacionadas: PMID:23766293, PMID:24357634, PMID:18056426
• A EIF3A está localizada no citoplasma.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; a proteína contém motivos de hélice enrolada e de ligação ao RNA, e participa de interações entre hospedeiro e vírus.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1–250 da região N-terminal da EIF3A humana. Considere esse aspecto ao projetar reagentes complementares de detecção ou estudos de mapeamento de epítopos.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 167 kDa. Utilize condições redutoras de SDS-PAGE e valide a banda observada em seus lisados celulares ou teciduais específicos.
• Para imunocitoquímica/imunofluorescência (IF/ICC), a fixação com paraformaldeído a 4% e a permeabilização com Triton X-100 a 0,1–0,3% são geralmente adequadas. Confirme as condições ideais em seu modelo celular.
• Ao utilizar ELISA, os tampões de revestimento e os sistemas de detecção adequados devem ser otimizados. Considere a combinação com um anticorpo de captura validado para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.

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