Anticorpo Policloal Anti-eIF3B para WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de eIF3B

• eIF3B é uma subunidade central do complexo do fator de iniciação da tradução eucariótico 3 (eIF-3), essencial para várias etapas da iniciação da síntese proteica, incluindo a formação do complexo pré-iniciação 43S, o recrutamento e a varredura de mRNA, bem como a desmontagem e reciclagem de complexos ribossomais pós-terminação. Referências relacionadas: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815 PMID:9388245
• O complexo eIF-3 alvo especificamente e regula a tradução de um subconjunto de mRNAs envolvidos na proliferação, diferenciação e apoptose celular, empregando diferentes modos de ligação a estruturas de haste e loop de RNA para ativar ou reprimir a tradução. Referências relacionadas: PMID:25849773
• eIF3B é uma proteína de ligação a RNA que contribui para o recrutamento de fatores de iniciação (eIF-1, -1A, -2:GTP:Met-tRNAi, -5) à subunidade ribossomal 40S, facilitando a formação do complexo pré-iniciação 43S. Referências relacionadas: PMID:17581632 PMID:25849773 PMID:27462815
• Subcelularmente, eIF3B é encontrada no citoplasma e pode se localizar em grânulos de estresse, o que sugere papéis no controle traducional sob condições de estresse.
• No contexto de infecção microbiana, eIF3B desempenha um papel na tradução do calcivírus felino (FCV), participando de um evento de terminação-reiniciação ribossomal que leva à síntese da proteína VP2. Referências relacionadas: PMID:18056426
• As modificações pós-traducionais de eIF3B incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua função ou a montagem do complexo.
• A proteína é caracterizada pela presença de repetições WD, que estão envolvidas em interações proteína-proteína, e sofre splicing alternativo, produzindo isoformas.
• eIF3B também é conhecida como homologo PRT1, eIF3S9, eIF-3-eta, eIF3 p110 e eIF3 p116. O peso molecular calculado é de aproximadamente 92,5 kDa, mas migra em torno de 93 kDa por SDS-PAGE.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, é esperada uma banda de aproximadamente 93 kDa. Considere usar lisados de células totais ou extratos citoplasmáticos de amostras humanas, de camundongo ou de rato, e incluir controles positivos e negativos adequados para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), garanta a fixação e permeabilização celular adequadas. A coloração é predominantemente citoplasmática; sob condições de estresse, eIF3B pode se localizar em grânulos de estresse, portanto, considere induzir o estresse para observar a formação de grânulos.
• Para aplicações em ELISA, a natureza policlonal e o reconhecimento de múltiplos epítopos podem aumentar a sensibilidade, mas a variabilidade entre lotes deve ser controlada por padronização.
• Como se trata de um anticorpo policlonal de coelho produzido contra eIF3B humana, a validação do alvo endógeno no sistema de amostra pretendido é recomendada, especialmente ao alternar entre espécies (humano, camundongo, rato).
• Embora não listado nas aplicações padrão, o anticorpo pode ser adequado para imunoprecipitação do complexo eIF-3; no entanto, isso deve ser testado empiricamente.

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