Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-eIF3B para WB, IF/ICC, ELISA - P55884

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF3B

• O fator de iniciação da tradução eucariótica 3 subunidade B (eIF3B), também conhecido como PRT1, EIF3S9, eIF3-p110 ou eIF3-p116, é um componente central do complexo do fator de iniciação da tradução eucariótica 3 (eIF-3), que desempenha um papel crítico na síntese proteica direcionando e iniciando a tradução de um subconjunto de mRNAs envolvidos na proliferação celular, ciclo celular, diferenciação e apoptose.
• O complexo eIF-3 é necessário para várias etapas na iniciação da tradução: associa-se à subunidade ribossomal 40S para facilitar o recrutamento de fatores de iniciação, estimula o recrutamento de mRNA e a varredura para reconhecimento do AUG, e é essencial para a desmontagem e reciclagem de complexos ribossomais pós-terminação para evitar junção prematura das subunidades. Referências relacionadas: PMID:17581632 PMID:9388245
• O eIF3B é uma subunidade chave de ligação ao RNA que permite ao complexo eIF-3 regular especificamente a tradução de mRNAs relacionados à proliferação celular, usando diferentes modos de ligação ao loop do caule do RNA, atuando como um ativador ou repressor da tradução. Referências relacionadas: PMID:25849773
• No contexto da infecção pelo calicivírus felino (FCV), o eIF3B participa do evento de terminação-reiniciação ribossomal que direciona a tradução da proteína viral VP2, destacando seu papel nas interações hospedeiro-patógeno. Referências relacionadas: PMID:18056426
• Subcelularmente, o eIF3B é predominantemente citoplasmático e pode se localizar em grânulos de estresse, organelas sem membrana que se formam sob condições de estresse celular para armazenar temporariamente mRNAs e regular a tradução.
• O eIF3B sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem modular sua atividade e interações dentro da maquinaria de iniciação da tradução.
• Estruturalmente, o eIF3B contém domínios de repetição WD e pertence à família de proteínas de repetição WD, conhecidas por facilitar interações proteína-proteína e formar estruturas semelhantes a hélices, consistente com seu papel na montagem do complexo eIF-3 multi-subunidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para aplicações de Western blot, espere uma banda predominante em aproximadamente 93 kDa correspondente ao eIF3B de comprimento total; considere usar um controle de carga e normalizar os sinais entre as amostras.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), o eIF3B exibe uma distribuição citoplasmática; a permeabilização com detergentes como Triton X-100 ou saponina é necessária, e a coloração pode se localizar em grânulos de estresse sob condições de estresse celular.
• O anticorpo mostra reatividade cruzada com homólogos de camundongo e rato; no entanto, é recomendado validar a especificidade de ligação e o desempenho nessas espécies usando controles positivos e negativos apropriados.
• Para ELISA, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal; considere um formato de ELISA direto ou sanduíche dependendo dos requisitos e sensibilidade do ensaio.
• Como o imunógeno corresponde a um fragmento recombinante (aminoácidos 101–200), o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo linear conservado na região N-terminal; pode ser adequado para aplicações que requerem proteínas desnaturadas, embora o reconhecimento da conformação nativa deva ser verificado empiricamente.

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