Anticorpo Policloal Anti-EIF3M para WB, IHC-P, ELISA - Q7L2H7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EIF3M

• EIF3M (subunidade M do fator de iniciação da tradução eucariótica 3) também é conhecida como proteína B5 do pulmão fetal (hFL-B5), proteína 1 contendo domínio PCI (PCID1), B5, GA17, TANGO7 e hfl-B5. É codificada pelo gene EIF3M (também designado HFLB5, PCID1) e funciona como subunidade do complexo eIF-3.
• EIF3M é um componente essencial do complexo eIF-3, que é necessário para múltiplas etapas da iniciação da tradução: o complexo se liga ao ribossomo 40S, recruta fatores de iniciação para montar o pré-complexo de iniciação 43S, estimula a varredura do mRNA e promove a desmontagem dos ribossomos pós-terminação. Referências relacionadas: PMID:17403899, PMID:25849773, PMID:27462815
• Por meio da ligação diferencial a laços de haste do RNA, o complexo eIF-3 (via EIF3M) exerce ativação ou repressão traducional sobre um subconjunto de mRNAs que controlam a proliferação celular, a diferenciação e a apoptose. Referências relacionadas: PMID:25849773
• EIF3M está predominantemente localizada no citoplasma, o que é consistente com sua função na iniciação da tradução.
• A proteína é amplamente expressa em todos os tecidos humanos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas. Além disso, EIF3M pode desempenhar um papel na entrada viral, pois foi implicada na facilitação da infecção pelo herpes simplex vírus 1 (HSV-1) e pelo herpes simplex vírus 2 (HSV-2).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína recombinante que cobre a EIF3M de comprimento total (aminoácidos 1–374). Este design pode reagir com todas as isoformas; no entanto, é aconselhável validar o anticorpo no seu sistema de amostra específico.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~42 kDa. Use controles de carga adequados e execute um lisado de controle positivo de células humanas, de camundongo ou de rato, pois o anticorpo apresenta reatividade cruzada com essas espécies.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) devem ser otimizadas empiricamente. Teste em tecidos positivos conhecidos, como seções de tumor proliferativo, dado o papel da EIF3M no ciclo celular.
• Em aplicações de ELISA, a natureza policlonal pode proporcionar captura robusta; considere o pareamento com um anticorpo monoclonal anti-EIF3M para um formato de ELISA sanduíche se a quantificação for necessária.
• Como a EIF3M faz parte de um grande complexo multiproteico, experimentos de co-imunoprecipitação podem ser viáveis, mas confirme a integridade do complexo nas suas condições de lise.

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