Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-eIF4A para WB, IF/ICC, ELISA - P60842 / Q14240 / P38919

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF4A

• eIF4A-1 (P60842), também conhecido como DDX2A, é uma RNA helicase dependente de ATP e uma subunidade principal do complexo de iniciação da tradução eIF4F.
• Como parte do eIF4F, o eIF4A-1 participa da iniciação da tradução dependente de 5' capa, desenrolando estruturas secundárias de RNA na região 5'-UTR dos mRNAs, permitindo a ligação do ribossomo e a varredura para o códon de início.
  Referências relacionadas: PMID:20156963
• Essa atividade de helicase é essencial para a síntese eficiente de proteínas e contribui para a proliferação e o crescimento celular.
• A família eIF4A é composta por três membros altamente homólogos: eIF4A-1 (P60842), eIF4A-2 (Q14240) e eIF4A-3 (P38919), todos compartilhando domínios conservados de helicase do tipo DEAD-box.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, a região perinuclear, a membrana celular e os grânulos de estresse, onde o eIF4A é recrutado sob condições de estresse celular.
• Modificações pós-traducionais como acetilação, fosforilação e ubiquitinação regulam sua atividade e estabilidade.
• O eIF4A-1 também está implicado nas interações hospedeiro-vírus, desempenhando papéis importantes na replicação de certos vírus.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que cobre a região N-terminal (aa 1-100) do eIF4A-1 humano. O anticorpo policlonal resultante pode reconhecer múltiplos membros da família eIF4A devido à alta conservação de sequência; recomenda-se verificar a especificidade para a isoforma alvo no lisado de células ou tecido relevante.
• Para Western blotting, é esperada uma banda dominante em torno de 46 kDa para o eIF4A-1, com possíveis bandas adicionais correspondentes ao eIF4A-2 (aprox. 46 kDa) e eIF4A-3 (aprox. 48 kDa). Utilize controles positivos e negativos apropriados.
• Em imunofluorescência/ICC, a marcação pode ser observada no citoplasma e no núcleo, com possível enriquecimento na região perinuclear ou nos grânulos de estresse sob condições de estresse. O pré-tratamento das células para induzir a formação de grânulos de estresse (por exemplo, com arsenito) pode ser usado para estudos de localização.
• Para ELISA, o anticorpo é adequado como reagente de captura ou detecção em formatos sanduíche; a reatividade cruzada com outras proteínas da família eIF4A deve ser avaliada empiricamente.
• Como anticorpo policlonal, o desempenho consistente entre lotes deve ser validado; considere a utilização de padrões de referência internos para ensaios quantitativos.

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