Anticorpo Policlonal Anti-eIF4A1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60842

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eIF4A1

• O fator de iniciação eucariótico 4A-I (eIF4A1) é uma RNA helicase dependente de ATP que atua como uma subunidade do complexo eIF4F, desempenhando um papel central na iniciação da tradução dependente de cap.
  Referências relacionadas: PMID:20156963
• A eIF4A1 desenrola estruturas secundárias de RNA dentro do 5'-UTR dos mRNAs, facilitando a ligação ribossomal e a varredura para o códon de início—um processo que promove a proliferação e o crescimento celular.
  Referências relacionadas: PMID:20156963
• Nomes alternativos incluem DDX2A, EIF4A, eIF-4A, eIF4A-I e eIF-4A-I, refletindo sua classificação como uma RNA helicase da caixa DEAD.
• A proteína é encontrada predominantemente no citoplasma, incluindo a região perinuclear, e também pode se localizar na membrana celular e nos grânulos de estresse.
• A eIF4A1 passa por modificações pós-traducionais como acetilação, fosforilação e ubiquitinação (conjugação Ubl), que provavelmente regulam sua função e interações.
• Ela participa de interações hospedeiro-vírus, destacando seu papel nos mecanismos de defesa celular.
• Como um fator de iniciação chave para a biossíntese proteica, a eIF4A1 foi identificada em inúmeros estudos de proteômica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético abrangendo a região N-terminal (aminoácidos 1–100). Este projeto frequentemente resulta em alta especificidade; no entanto, a reatividade cruzada com outras isoformas de eIF4A ou membros da família da caixa DEAD deve ser verificada, se necessário.
• Para Western blotting, o peso molecular esperado é de aproximadamente 46 kDa. Use lisados de controle positivo apropriados (ex.: HeLa, HEK293) e valide a especificidade da banda com knockdown por siRNA ou competição com o peptídeo imunizante.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, otimize as condições de fixação e permeabilização de acordo com o tipo de amostra. Coloração citoplasmática e perinuclear são esperadas, mas a localização em grânulos de estresse pode ser observada sob condições de estresse.
• Para imunoprecipitação, confirme a eficiência por blotting com um anticorpo alternativo para eIF4A1 ou por espectrometria de massa.
• O desempenho no ELISA pode ser avaliado usando proteína recombinante ou placas revestidas com peptídeo; titule o anticorpo para obter relações sinal-ruído ideais.

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