Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-eIF4A3 para WB, IF/ICC, ELISA - P38919

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eIF4A3

• Codificado pelo gene EIF4A3, a proteína também é conhecida como RNA helicase ATP-dependente DDX48, proteína da matriz nuclear 265 (NMP265) e fator de iniciação eucariótico 4A-III.
• É um componente integral do spliceossomo, essencial para o splicing do pré-mRNA. Referências relacionadas: PMID:11991638, PMID:22961380, PMID:28076346
• Atua como RNA helicase ATP-dependente, facilitando o desenrolamento ATP-dependente de estruturas secundárias de RNA durante o splicing do pré-mRNA e outros processos. Referências relacionadas: PMID:16170325
• É um componente central do complexo de junção de exões (EJC), depositado no mRNA nas junções de splicing para marcar os limites entre exões e influenciar processos pós-splicing como exportação nuclear, localização subcelular, eficiência da tradução e degradação de mRNA sem sentido (NMD). Referências relacionadas: PMID:16170325, PMID:16209946, PMID:16314458
• A atividade da helicase é estimulada por CASC3 e inibida pelo heterodímero MAGOH-RBM8A, que estabiliza o EJC no mRNA processado por splicing em uma conformação ligada a ATP.
• Modula o splicing alternativo de genes apoptóticos como BCL2L1, inibindo a produção da isoforma pró-apoptótica Bcl-X(S). Referências relacionadas: PMID:22203037
• Está envolvido no desenvolvimento craniofacial. Referências relacionadas: PMID:24360810
• Subcelularmente, ele se localiza no núcleo, nas speckles do nucleoplasma e no citoplasma. É expresso de forma ubíqua e sofre modificações pós-traducionais incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 34–125 da eIF4A3 humana; portanto, o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo N-terminal conservado. Considere verificar a especificidade com proteína recombinante ou lisados de células que superexpressam eIF4A3.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~47 kDa. Use lisados totais de células de linhas celulares humanas (HeLa, HEK293), de camundongo ou de rato como controles positivos. Valide no seu sistema de amostra específico.
• Em imunofluorescência/ICC, antecipe marcação nuclear (com padrão pontilhado) e possivelmente citoplasmática. Estudos de colocalização com marcadores de spliceossomo ou EJC podem confirmar a especificidade do alvo.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado com o imunógeno ou a proteína eIF4A3 purificada. Estabeleça condições ótimas de revestimento e detecção de forma empírica.

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