Anticorpo Policlonais Anti-eIF4E para WB, IF/ICC, ELISA - P06730

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eIF4E

• O fator de iniciação da tradução eucariótica 4E (eIF4E) também é conhecido como subunidade de 25 kDa da eIF-4F ou proteína de ligação à capa do mRNA, codificado pelo gene EIF4E. É um regulador central da síntese proteica.
• Reconhece e se liga à capa de 7-metilguanosina (m7G) na extremidade 5' dos mRNAs como componente principal do complexo eIF4F, facilitando o desnaturamento das estruturas secundárias do mRNA e o recrutamento do ribossomo para a iniciação da tradução. Referências relacionadas: PMID:16271312 PMID:22578813
• Medea a exportação nuclear de um subconjunto de mRNAs, incluindo a ciclina D1 (CCND1), NOS2 e MDM2, através do reconhecimento do elemento 4ESE e da montagem de um complexo de transporte envolvendo LRPPRC e XPO1. Referências relacionadas: PMID:23471078 PMID:22684010
• Atua na repressão translacional como parte do complexo CYFIP1-EIF4E-FMR1 e participa do armazenamento de mRNAs inativos para tradução em corpos de processamento citoplasmáticos (corpos P). Referências relacionadas: PMID:24335285
• Desempenha papéis não canônicos no núcleo, promovendo a metilação da capa, o splicing do pré-mRNA e o processamento da extremidade 3', em parte ao facilitar a exportação e a tradução de RNAs que codificam fatores de capagem e clivagem. Referências relacionadas: PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, que modulam sua atividade; tem sido implicado na espermatogênese e na sinalização antiapoptótica através da regulação do transporte e da tradução de mRNAs específicos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à proteína eIF4E humana de comprimento total (aminoácidos 1–217). Espera-se que este anticorpo detecte a eIF4E endógena com aproximadamente 25 kDa em amostras humanas.
• Para Western blot (WB), considere usar lisados de células totais de HeLa, HEK293 ou Jurkat como controles positivos. Uma faixa de diluição de 1:500–1:2000 é comum para anticorpos policlonais, mas recomenda-se a otimização.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), a eIF4E se localiza principalmente no citoplasma, sendo possível a coloração nuclear e em corpos P dependendo do tipo celular e das condições; valide os padrões de coloração no seu sistema específico.
• Para aplicações em ELISA, este anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; faça a titulação para determinar a concentração de trabalho ideal para o formato do seu ensaio.

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