Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-eIF4EBP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13541

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eIF4EBP1

• A eIF4EBP1 é um repressor da iniciação da tradução que compete com a eIF4G1/eIF4G3 pela ligação à proteína de ligação à capa de mRNA eIF4E. A eIF4EBP1 hipofosforilada liga-se fortemente à eIF4E, impedindo a sua incorporação no complexo eIF4F e inibindo a tradução dependente da capa.
• A hiperfosforilação da eIF4EBP1 em resposta a estímulos como fatores de crescimento e hormonas leva à sua dissociação da eIF4E, permitindo a montagem do complexo eIF4F e a iniciação da tradução. Esta regulação envolve as vias de sinalização da quinase MAP e da mTORC1.
• Também conhecida como PHAS-I (proteína fosforilada, termo- e ácido-estável regulada pela insulina 1), a eIF4EBP1 é um mediador chave que liga sinais extracelulares ao controlo da síntese proteica.
• A proteína está localizada tanto no citoplasma como no núcleo, consistente com o seu papel na regulação da tradução e possivelmente noutras funções nucleares.
• A eIF4EBP1 está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que afinam a sua atividade e estabilidade.
• Como membro da família de proteínas de ligação à eIF4E, a eIF4EBP1 partilha semelhanças estruturais e funcionais com outras 4E-BPs, mas exibe características regulatórias distintas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde à região N-terminal (aa 1-100) da eIF4EBP1 humana; assim, o anticorpo pode reconhecer preferencialmente a proteína de comprimento total e fragmentos N-terminais. Considere a recuperação antigénica ou condições desnaturantes para uma exposição ótima se o alvo forem epítopos internos em amostras fixadas.
• Para Western blot, a eIF4EBP1 tem um peso molecular previsto de ~13 kDa, mas modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação) podem resultar em múltiplas bandas ou desvios. Valide no sistema de amostra relevante e inclua inibidores de fosfatase se o estado de fosforilação for crítico.
• Para imunofluorescência/ICC, realize uma fixação e permeabilização adequadas para aceder aos reservatórios citoplasmáticos e nucleares. Inclua controlos para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, emparelhe com um anticorpo de captura ou deteção adequado para construir um ensaio de sanduíche, considerando a região do epítopo linear reconhecida.

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