Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-eIF4EBP1 para IHC-P e ELISA - Q13541

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF4EBP1

• A proteína de ligação ao fator de iniciação de tradução eucariótica 4E 1 (eIF4EBP1), também conhecida como PHAS-I, é um repressor chave do início da tradução dependente da capa 5'. Ela funciona ligando-se à subunidade eIF4E e impedindo a sua montagem no complexo eIF4F.
• O eIF4EBP1 hipofosforilado compete com a proteína de andaime eIF4G por um local de ligação partilhado no eIF4E, inibindo assim a tradução. A hiperfosforilação em resposta a fatores de crescimento, hormonas ou nutrientes dissocia o eIF4EBP1 do eIF4E, permitindo a formação do complexo eIF4F e o início da tradução.
• A atividade do eIF4EBP1 é principalmente regulada através das vias de sinalização mTORC1 e quinase MAP, integrando sinais extracelulares e intracelulares para controlar a síntese proteica.
• O eIF4EBP1 está predominantemente localizado no citoplasma, mas também pode ser detetado no núcleo, consistente com os seus papéis na regulação da tradução e possivelmente na exportação do eIF4E.
• Modificações pós-traducionais, particularmente a fosforilação em múltiplos locais, acetilação e ubiquitinação, modulam dinamicamente a sua afinidade pelo eIF4E e as suas funções reguladoras.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio foi desenhado contra a região N-terminal (aminoácidos 1-118) do eIF4EBP1 humano, que abrange uma região crítica para a ligação ao eIF4E e a regulação dependente de fosforilação. Isto sugere que o anticorpo pode reconhecer tanto as formas fosforiladas como as não fosforiladas, mas recomenda-se a validação no sistema de amostra relevante.
• Para aplicações de IHC-P, considere condições de recuperação de antigénio adequadas para antigénios nucleares e citoplasmáticos e inclua controlos de tecido apropriados (por exemplo, tecidos com expressão conhecida alta/baixa de eIF4EBP1). A reatividade cruzada com camundongo e rato indica utilidade potencial nestas espécies.
• Para ELISA, use proteína recombinante eIF4EBP1 ou lisados celulares como antigénios de revestimento e teste diluições do anticorpo num formato de xadrez. Uma vez que o anticorpo é um pAb policlonal de coelho, o sinal pode variar entre lotes.
• Como um anticorpo policlonal, oferece reconhecimento amplo de epítopos, o que pode ser vantajoso para detetar múltiplas isoformas ou modificações, mas também pode exigir um bloqueio cuidadoso e seleção de anticorpo secundário para minimizar o fundo.

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