Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-EIF5 para WB, IF/ICC, ELISA - P55010

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fator de Iniciação da Tradução Eucariótica 5 (eIF5)

• O fator de iniciação da tradução eucariótica 5 (eIF5) é codificado pelo gene EIF5 e é um componente-chave do complexo pré-iniciação 43S (43S PIC) que varre a região 5' não traduzida do mRNA para localizar o códon de início. Referências relacionadas: PMID:11166181, PMID:22813744, PMID:24319994
• Dentro do 43S PIC, eIF5 atua como uma proteína ativadora de GTPase (GAP) que estimula a hidrólise de GTP pela subunidade gama do eIF2 (EIF2S3). Referências relacionadas: PMID:11166181
• Durante a varredura, o domínio N-terminal (NTD) de eIF5 interage com EIF1A, enquanto seu domínio C-terminal (CTD) se liga a EIF1, ajudando a manter EIF1 na conformação aberta do PIC. Referências relacionadas: PMID:22813744, PMID:24319994
• Após o reconhecimento do códon de início, o NTD de eIF5 desencadeia a hidrólise do GTP de eIF2γ, induzindo um estado fechado do PIC que aumenta a afinidade do CTD por EIF2β, libera EIF1 e estabiliza o complexo fechado. Referências relacionadas: PMID:11166181, PMID:22813744
• eIF5 localiza-se predominantemente no citoplasma, onde ocorre a iniciação da tradução.
• A proteína tem um peso molecular teórico de aproximadamente 49 kDa e está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para western blotting (WB), considere usar um controle de carregamento de proteína total e otimizar a diluição do anticorpo primário com base na banda alvo de aproximadamente 49 kDa.
• Ao realizar imunofluorescência (IF/ICC), inclua etapas adequadas de permeabilização e bloqueio; valide a especificidade do anticorpo nas espécies relevantes (humano, camundongo, rato).
• Para ELISA, use o imunógeno recombinante de EIF5 (aminoácidos 1-235) como controle positivo para gerar uma curva padrão.
• O anticorpo é produzido contra a região N-terminal humana de eIF5 de comprimento total (aa 1-235); confirme a reatividade no seu sistema de amostra e considere a reatividade cruzada com outros membros da família eIF5.

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