Anticorpo Policlonar Anti-EIF5A2 para WB, ELISA - Q9GZV4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EIF5A2

• Codifica o fator de iniciação da tradução eucariótica 5A-2 (eIF5A2), uma proteína altamente conservada que facilita o alongamento e a terminação da tradução, especialmente em ribossomos parados em motivos de poliprolina e outras sequências difíceis. Referências relacionadas: PMID:14622290
• Atua como cofator de controle de qualidade de ribossomos (RQC), auxiliando na transferência de peptidil durante a formação de cauda CAT em ribossomos parados, e também participa da degradação de mRNA e vias de integridade da parede celular responsivas ao estresse (por similaridade).
• A família eIF5A inclui duas isoformas em humanos: EIF5A1 (expressa constitutivamente) e EIF5A2 (frequentemente superexpressa em cânceres), ambas requerem hipusinação pós-traducional para atividade.
• A localização subcelular abrange o citoplasma, o núcleo e a membrana do retículo endoplasmático, o que é consistente com seus papéis na tradução, exportação nuclear de mRNAs e processos co-traducionais.
• As principais modificações pós-traducionais incluem a formação de hipusina (essencial para a atividade) e acetilação, além de capacidade de ligação a RNA; a proteína madura tem cerca de 17 kDa.
• A análise de expressão tecidual mostra níveis elevados no testículo, enquanto a superexpressão foi documentada em linhas de células cancerosas ovarianas, colorretais e outras, correlacionando-se com prognóstico desfavorável.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à proteína de comprimento total (aa 1-153), cobrindo o domínio N-terminal crítico para ligação ao ribossomo e hipusinação; esse design suporta a detecção de formas precursoras e maduras em géis desnaturantes.
• Para western blotting, considere executar lisados totais de células ou tecidos em condições redutoras; a EIF5A2 migra perto de 17 kDa, e recomenda-se o uso de controles de carregamento em torno de 15–20 kDa.
• Valide a reatividade no seu sistema de amostra: este anticorpo é previsto para ter reatividade cruzada com EIF5A2 de humano, camundongo e rato, mas a expressão endógena pode variar; confirme com controles positivos e negativos.
• Aplicações em ELISA podem se beneficiar do uso de EIF5A2 recombinante purificada como padrão e da titulação das concentrações do anticorpo para otimizar as razões sinal-ruído.

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