Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-EMC4 para WB, IHC-P, ELISA - Q5J8M3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EMC4

• O EMC4, também conhecido como PIG17 ou TMEM85, é uma subunidade do complexo de proteínas da membrana do retículo endoplasmático (EMC), uma insertase multiproteica que facilita a biogênese de proteínas de membrana.
• O EMC medeia a inserção independente de energia de proteínas de membrana recém-sintetizadas na membrana do RE, com preferência por substratos contendo domínios transmembrana fracamente hidrofóbicos ou desestabilizantes. Referências relacionadas: PMID:29242231, PMID:29809151, PMID:30415835
• É essencial para a inserção cotraducional de proteínas de membrana multipasso, garantindo a integração adequada da sequência de âncora de parada de transferência nas membranas do RE. Referências relacionadas: PMID:29809151, PMID:30415835
• Além disso, o EMC4 é necessário para a inserção pós-traducional de proteínas com âncora C-terminal (TA) na membrana do RE. Referências relacionadas: PMID:29242231, PMID:29809151
• Ao medir a inserção cotraducional adequada de domínios transmembrana N-terminais em uma topologia N-exo, o EMC controla a orientação topológica de proteínas de membrana multipasso, como os receptores acoplados à proteína G (GPCRs). Referências relacionadas: PMID:30415835
• O EMC4 localiza-se na membrana do retículo endoplasmático. O splicing alternativo gera isoformas com expressão tecidual distinta — a isoforma 1 é expressa no cérebro e coração, enquanto a isoforma 2 é expressa no coração.
• A proteína está sujeita a acetilação e fosforilação e foi identificada em análises de proteômica; é anotada com palavras-chave incluindo splicing alternativo, apoptose e domínios transmembrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: O imunógeno recombinante cobre os aminoácidos 1–100 do EMC4 humano (região N-terminal). Considere verificar a reatividade do anticorpo contra a proteína endógena de comprimento total, pois esta região pode incluir elementos estruturados e desordenados.
• Western blot: O anticorpo detecta bandas em torno de 15 kDa, 16 kDa e 20 kDa, provavelmente refletindo modificações pós-traducionais ou diferenças de isoformas. Valide esses padrões em seu sistema de amostra específico.
• IHC-P: As condições de recuperação de antígeno e detecção devem ser otimizadas para cada tipo de tecido. Nenhum protocolo único é universalmente aplicável; estudos piloto são recomendados.
• ELISA: Adequado para formatos de ensaio padrão; no entanto, as condições de revestimento e as faixas de detecção devem ser determinadas empiricamente.
• Reatividade cruzada: O anticorpo reage cruzadamente com o EMC4 de camundongo e rato, mas as diluições de trabalho ideais podem variar entre as espécies. A titulação é aconselhada.
• Nota geral: Todos os experimentos devem incluir controles positivos e negativos apropriados para confirmar a especificidade.

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