Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Endo G para WB, ELISA - Q14249

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Endo G

• A Endo G é uma endonuclease mitocondrial codificada pelo gene ENDOG, localizada principalmente na mitocôndria (LOCALIZAÇÃO SUBCELULAR: Mitocôndria).
• Ela cliva preferencialmente DNA de fita dupla que contém 5-hidroximetilcitosina (5hmC), exibindo maior eficiência de corte e especificidade de sítio para DNAs modificados (PubMed:25355512). Referências relacionadas: PMID:25355512
• Apresenta afinidade significativamente maior para junções Holliday de quatro fitas, em comparação com DNAs duplex e de fita simples, sugerindo um papel na recombinação do DNA (Por similaridade).
• Promove a recombinação homóloga conservadora quando os substratos são modificados por 5hmC (PubMed:25355512). Referências relacionadas: PMID:25355512
• Medeia a autofagia suprimindo a via mTOR por meio de interação dependente de fosforilação com YWHAG e da resposta ao dano de DNA induzida pela sua atividade de endonuclease (PubMed:33473107). Referências relacionadas: PMID:33473107
• A fosforilação mediada por GSK3-beta aumenta a ligação da Endo G a YWHAG, o que libera TSC2 e PIK3C3 de YWHAG, levando à supressão de mTOR e ao início da autofagia (PubMed:33473107). Referências relacionadas: PMID:33473107
• Cliva o DNA mitocondrial (mtDNA) em resposta ao estresse oxidativo e nitrosativo, induzindo assim a replicação compensatória do mtDNA (PubMed:29719607). Referências relacionadas: PMID:29719607
• A proteína contém pontes dissulfeto e é regulada pós-traducionalmente por fosforilação (Palavras-chave: Ponte dissulfeto, Fosfoproteína).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 198–297 da Endo G humana. Pesquisadores podem considerar mapear essa região em domínios funcionais ou estruturais conhecidos para prever a acessibilidade do epítopo.
• Para aplicações em Western blot, a Endo G migra em aproximadamente 33 kDa. Inclua controles positivos adequados (por exemplo, frações mitocondriais de células humanas, de camundongo ou de rato) e valide a detecção no seu tipo específico de amostra.
• Devido à sua localização mitocondrial, a extração eficiente da proteína pode exigir kits de isolamento mitocondrial ou tampões de lise otimizados para proteínas de organelas.
• Em ELISA, pode ser considerada a combinação com um anticorpo de captura/detecção adequado; confirme a linearidade e a sensibilidade usando Endo G recombinante ou lisados celulares.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato. Valide a especificidade em cada espécie, especialmente se a homologia de sequência na região do imunógeno for diferente.

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