Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Endotelina 1 (ET1, PPET1) para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05305

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Endotelina 1

• A endotelina-1 (ET-1), codificada pelo gene EDN1, pertence à família das endotelinas e é inicialmente sintetizada como pré-pró-endotelina-1 (PPET1), um precursor de 212 aminoácidos processado em peptídeos ativos por meio da clivagem em resíduos básicos pareados e da formação de pontes dissulfeto.
• Atua como um peptídeo vasoconstritor derivado do endotélio e provável ligante dos receptores acoplados à proteína G EDNRA e EDNRB, desencadeando a sinalização de PTK2B, BCAR1, BCAR3 e das GTPases RAP1 e RHOA nas células mesangiais glomerulares.
  Referências relacionadas: PMID:19086031
• Além disso, a ET-1 liga-se ao receptor DEAR/FBXW7-AS1, ampliando seu repertório funcional para além dos receptores clássicos de endotelina.
  Referências relacionadas: PMID:17446437
• Por meio da sinalização ROCK, a ET-1 promove o remodelamento da parede arterial mesentérica, facilitando a translocação nuclear de NFATC3 e a transcrição de marcadores de hipertrofia do músculo liso, como ACTA2.
• A proteína é secretada e apresenta expressão específica nos tecidos do pulmão, nos vasos das vilosidades coriônicas placentárias e nas células musculares lisas vasculares placentárias cultivadas, destacando seus papéis na fisiologia vascular respiratória e reprodutiva.
• As principais características do processamento pós-traducional incluem a clivagem em um par de resíduos básicos e a formação de pontes dissulfeto, conforme anotado; as palavras-chave também indicam seu status de vasoconstritor e de proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 18-212 da pré-pró-proteína da Endotelina-1 humana (NP_001946.3), abrangendo a maior parte da sequência precursora. Esse desenho pode reconhecer tanto a pré-pró-proteína de comprimento completo quanto suas formas processadas proteoliticamente; considere validar a detecção de isoformas específicas no seu sistema de amostra.
• Na análise por Western blot (WB), pode ser observada uma banda em torno de 24 kDa correspondente à pré-pró-proteína, mas bandas adicionais provenientes de peptídeos processados, como a big endotelina-1 (~4-5 kDa) e a ET-1 madura (~2,5 kDa), podem aparecer em condições redutoras. Otimize adequadamente a porcentagem do gel e as condições de transferência.
• Na imunocitoquímica (IF/ICC) e na imuno-histoquímica (IHC-P), assegure uma fixação e permeabilização adequadas para obter a melhor acessibilidade dos epítopos e inclua controles de bloqueio com peptídeo para confirmar a especificidade, se necessário.
• Para aplicações em ELISA, teste a combinação e a diluição dos anticorpos no seu próprio sistema de matriz, pois o desempenho pode variar de acordo com o tipo de amostra e o formato do ensaio.

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