Anticorpo Monoclonal Anti-eNOS para WB, IHC-P, ELISA - P29474

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eNOS

• A eNOS (NOS3) gera óxido nítrico (NO), uma molécula de sinalização gasosa que relaxa o músculo liso vascular via cGMP. Referências relacionadas: PMID:1378832
• O NO proveniente da eNOS também impulsiona a angiogênese coronária induzida por VEGF e facilita a coagulação mediada por plaquetas.
• O gene NOS3 produz duas isoformas; a isoforma 2 carece de atividade catalítica e atua como um regulador dominante-negativo ao heterodimerizar com a isoforma 1.
• A eNOS localiza-se principalmente nas caveolas da membrana plasmática, mas também se associa ao aparelho de Golgi, ao citoesqueleto e ao citoplasma.
• É expressa em plaquetas, placenta, fígado e rim.
• A eNOS é uma enzima multinodomínio que requer FAD, FMN, NADPH, heme, cálcio e calmodulina para sua atividade, sendo regulada por miristoilação, palmitoilação e fosforilação.
• Pertence à família da óxido nítrico sintase; seu peso molecular é de aproximadamente 133 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o segmento C-terminal (aa 1035–1110) da eNOS humana, o que pode distinguir a isoforma ativa de comprimento total de variantes truncadas; confirme a especificidade usando ensaios específicos para isoformas.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em ~133 kDa; inclua lisados endoteliais (por exemplo, HUVEC) como controles positivos e use condições redutoras apropriadas.
• Na análise imuno-histoquímica (parafina), a recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) e tecidos com alta expressão endógena de eNOS (por exemplo, placenta, rim) são recomendados como etapas iniciais de validação.
• O desempenho no ELISA depende do formato de revestimento e do sistema de detecção; a reatividade cruzada com a eNOS de rato e camundongo permite flexibilidade em ensaios correspondentes à espécie.

CamelBio: Sua Ponte de Fornecimento Tudo-em-Um

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