Anticorpo monoclonal de coelho anti-ENT2/SLC29A2 para IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14542

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ENT2/SLC29A2

• ENT2/SLC29A2 é um membro da família SLC29 de transportadores equilibrativos de nucleosídeos, codificado pelo gene SLC29A2 (alias DER12, ENT2, HNP36). Também é conhecido como HNP36 ou DER12.
• Funciona como um uniportador passivo bidirecional independente de Na+, que medeia a difusão facilitada de vários nucleosídeos (inosina, adenosina, uridina, timidina, citidina, guanosina) e nucleobases (hipoxantina, adenina, guanina, timina, uracila). Referências relacionadas: PMID:10722669, PMID:12527552, PMID:12590919, PMID:9478986, PMID:16214850, PMID:21795683
• Adicionalmente, transporta nicotinamida (PubMed:39885119) e urato (PubMed:40367900), estendendo seu papel na homeostase celular. Referências relacionadas: PMID:39885119, PMID:40367900
• Uma isoforma de splicing alternativo produz uma proteína não funcional que carece de expressão na membrana celular e não consegue transportar adenosina ou timidina.
• A localização subcelular é principalmente na membrana celular, com distribuição apical e basolateral relatada dependendo do tipo celular.
• A expressão tecidual inclui níveis elevados no músculo esquelético e expressão moderada no fígado, pulmão, placenta, cérebro, coração, rim, ovário e testículo. No rim, medeia o transporte basolateral de nucleosídeos; no testículo, facilita a captação apical de nucleosídeos nas células de Sertoli através da barreira hematotesticular; e no endotélio microvascular do músculo esquelético, controla o fluxo de hipoxantina para a produção de ROS. Referências relacionadas: PMID:12527552, PMID:23639800
• Prevê-se que a proteína seja glicosilada e fosforilada, com um peso molecular de aproximadamente 50 kDa (50113 Da), consistente com a banda de 50kDa relatada.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100) do ENT2/SLC29A2 humano; a reatividade cruzada com camundongo e rato sugere conservação de epítopos entre as espécies.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize a fixação e a permeabilização para detectar a proteína transmembrana; utilize controles positivos (por exemplo, músculo esquelético) e negativos.
• Em ELISA, valide o anticorpo como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento com um clone diferente pode ser necessário para ensaios do tipo sanduíche.
• O Western blotting pode mostrar bandas próximas a 50 kDa, mas a glicosilação e a fosforilação podem causar deslocamentos; considere o tratamento com desglicosilação ou fosfatase, se necessário.
• Os níveis de expressão variam entre os tecidos; a alta expressão de ENT2 no músculo esquelético torna-o um controle positivo recomendado.

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