Anticorpo Policlonal Anti-EP300 para IHC-P, ELISA - Q09472

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona Acetiltransferase p300

• A histona acetiltransferase p300 (também conhecida como proteína p300 associada ao E1A, KAT3B) é um grande coativador transcripcional de ~264 kDa codificado pelo gene EP300. Pertence à família de acetiltransferases p300/CBP que regulam a estrutura da cromatina e a expressão gênica.
• A p300 funciona como uma histona acetiltransferase, acetilando todas as quatro histonas centrais nos nucleossomos (H2A, H2B, H3, H4). Esta acetilação de histonas serve como uma marca epigenética para ativação transcripcional e também pode gerar marcas duplas acetil-metil (Kacme) nas histonas H3 e H4, associadas à cromatina ativa. Referências relacionadas: PMID:23415232 PMID:23934153 PMID:8945521 PMID:21131905 PMID:23911289 PMID:37731000
• Além das histonas, a p300 acetila inúmeras proteínas não histônicas, incluindo fatores de transcrição (por exemplo, p53/TP53, ALX1, FOXO1, STAT3) e outros reguladores (por exemplo, HDAC1, SIRT2), modulando assim sua estabilidade, ligação ao DNA ou atividade enzimática. Também participa da resposta a danos no DNA acetilando a histona H1 e a PCNA. Referências relacionadas: PMID:11511361 PMID:15448695 PMID:15653507 PMID:12929931 PMID:18722353
• A p300 exibe atividade aciltransferase versátil, utilizando vários substratos acil-CoA para catalisar a crotonilação, butirilação, 2-hidroisobutilação, lactilação, propionilação e isonicotinilação de histonas, ligando o metabolismo ao estado da cromatina. Referências relacionadas: PMID:17267393 PMID:25818647 PMID:29775581 PMID:31645732
• A localização subcelular inclui o núcleo, citoplasma e cromossomos. A p300 nuclear é recrutada para promotores por fatores de transcrição específicos e está implicada na regulação do ritmo circadiano através de interações com CLOCK/BMAL1. Referências relacionadas: PMID:14645221
• A p300 é um substrato para várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação, metilação, citrulinização e ubiquitinação, que ajustam finamente sua atividade e interações. Seu domínio bromo reconhece lisinas acetiladas, e a proteína contém motivos de dedo de zinco.
• Na patogênese viral, a p300 é sequestrada pela proteína Tat do HIV-1 para facilitar a transcrição proviral e interage com o E1A do adenovírus, ligando-a à transformação celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 940-1030, uma região que pode cobrir parte do domínio catalítico HAT ou outras regiões funcionais; este design pode ser adequado para detectar a p300 de comprimento total e possivelmente distingui-la da CBP altamente homóloga. Verifique a especificidade usando modelos de knockout ou knockdown.
• As aplicações recomendadas com base no fornecedor são IHC-P e ELISA. Para imuno-histoquímica, considere as condições de recuperação de antígenio e otimize a concentração do anticorpo para padrões de coloração nuclear e citoplasmática. Para ELISA, valide com a proteína p300 recombinante como padrão.
• Devido ao seu grande tamanho (264 kDa), use eletroforese em gel apropriada (por exemplo, SDS-PAGE a 6-8%) e tempos de transferência prolongados para o western blot, se tentado.
• Reage cruzadamente com a p300 de camundongo e rato de acordo com os dados do fornecedor, permitindo o uso em modelos roedores. No entanto, confirme a reatividade com seu tecido/linhagem celular específico.

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