Anticorpo policlonal de coelho anti-EpCAM para WB, IF/ICC, ELISA - P16422

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da EpCAM

• A EpCAM (molécula de adesão celular epitelial), também conhecida como TACSTD1, TROP1, EGP40 e CD326, é uma glicoproteína transmembrana do tipo I de aproximadamente 35 kDa que atua como uma molécula de adesão celular homofílica.
• Ela medeia interações homofílicas independentes de cálcio entre células epiteliais intestinais e linfócitos intraepiteliais, contribuindo para a barreira imunológica nas superfícies mucosas e fornecendo uma primeira linha de defesa contra infecções.
• A EpCAM desempenha um papel na proliferação e diferenciação de células-tronco embrionárias (ESC), e sua expressão diminui rapidamente após a diferenciação das ESC; ela aumenta a expressão de FABP5, MYC e das ciclinas A e E.
• A proteína localiza-se na membrana celular lateral e está enriquecida nas junções estreitas, o que é consistente com seu papel na adesão célula-célula e na integridade da barreira epitelial.
• A EpCAM é altamente e seletivamente expressa em ESC indiferenciadas e está presente na superfície de quase todas as membranas celulares epiteliais, mas está ausente em células mesodérmicas e neurais; ela também é detectada em células de adenocarcinoma.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto, e a EpCAM contém um peptídeo-sinal, um domínio extracelular com repetições do tipo 1 da tireoglobulina, uma única hélice transmembrana e uma curta cauda citoplasmática; ela é reconhecida como um antígeno tumoral e uma variante associada a doença no câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 24–265), que provavelmente é acessível na conformação nativa; esse desenho pode ser adequado para aplicações como WB, IF/ICC e ELISA.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 35 kDa; no entanto, devido à glicosilação e a outras modificações, a banda observada pode migrar de forma diferente. Valide em lisados de células epiteliais humanas, de camundongo ou de rato relevantes.
• Na IF/ICC, concentre-se na coloração da membrana com enriquecimento pontual nas junções; a permeabilização adequada é fundamental. Inclua controles apropriados, como linhagens de ESC indiferenciadas e diferenciadas, para confirmar a especificidade.
• Foi relatada reatividade cruzada com camundongo e rato, mas o desempenho em cada aplicação deve ser validado independentemente no sistema de amostra específico de interesse.

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