Anticorpo Policlonal Anti-EPHA3/EPHA4/EPHA5 para IHC-P, IF/ICC, ELISA - P29320 / P54764 / P54756

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de EPHA3/EPHA4/EPHA5

• EPHA3 (receptor tipo-A de efrina 3) é uma tirosina quinase de receptor que pertence à subfamília de receptores de efrina. Também é conhecido como EK4, HEK, TYRO4 e ETK1. O anticorpo reconhece o EPHA3, bem como os receptores intimamente relacionados EPHA4 e EPHA5, devido a epítopos conservados na região C-terminal.
• Ao ligar ligantes de efrina-A em células adjacentes, o EPHA3 medeia sinalização bidirecional: sinalização direta através de seu domínio de quinase intracelular e sinalização reversa através do ligante de efrina. Esta comunicação dependente de contato regula a adesão célula-célula, a dinâmica do citoesqueleto e a migração celular. Referências relacionadas: PMID:11870224
• O EPHA3 liga-se preferencialmente à efrina-A5 (EFNA5), mas também interage com a efrina-A1 (EFNA1). A ativação pela EFNA1 inibe a transição epitelial-mesenquimal em células cardíacas, contribuindo para o desenvolvimento cardíaco normal. Referências relacionadas: PMID:12794130
• O receptor localiza-se na membrana celular e também pode ser encontrado em formas secretadas. É uma proteína de membrana tipo I de passagem única com um domínio extracelular de ligação ao ligante, uma região rica em cisteína, duas repetições tipo III de fibronectina, um segmento transmembrana e um domínio intracelular de tirosina quinase.
• O EPHA3 é amplamente expresso, com os níveis mais altos observados na placenta, e desempenha um papel no mapeamento retinotectal de neurônios e na segregação de axônios motores e sensoriais durante o desenvolvimento do circuito neuromuscular.
• Características estruturais principais incluem atividades de ligação de ATP e transferase, N-glicosilação e fosforilação. A proteína de comprimento total tem um peso molecular calculado de aproximadamente 110 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo é um peptídeo sintético derivado de uma região conservada (aminoácidos 700-800) compartilhada pelo EPHA3, EPHA4 e EPHA5 humanos. Este design provavelmente contribui para a reatividade cruzada demonstrada com ortólogos de camundongo e rato.
• Para IHC-P, considere otimizar o método de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo. A validação deve ser realizada em amostras de tecido conhecidas por expressar membros da família EPHA, como placenta ou tecidos neuronais.
• Para IF/ICC, podem ser necessários protocolos de permeabilização para detectar epítopos intracelulares. Inclua controles apropriados, como células com expressão confirmada de EPHA.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar proteínas recombinantes ou nativas de EPHA3/4/5. Certifique-se de que o antígeno de revestimento e o sistema de detecção sejam compatíveis com um anticorpo policlonal de coelho.

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