Anticorpo Policlonal Anti-EPHA4 para WB, IF/ICC, ELISA - P54764

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EPHA4

• Receptor tipo-A de efrina 4 (EPHA4, também conhecido como EK8, SEK, HEK8, TYRO1) é um membro da família de receptores Eph de tirosina quinases de receptor, codificado pelo gene EPHA4.
• O EPHA4 liga ligantes de efrina ancorados à membrana em células adjacentes, iniciando sinalização bidirecional (forward através do receptor e reverse através do ligante). É unicamente promíscuo, ativado tanto por ligantes de efrina-A ligados a GPI (por exemplo, EFNA1) quanto por ligantes de efrina-B transmembrana (por exemplo, EFNB3).
• No sistema nervoso em desenvolvimento, o EPHA4 desempenha um papel crítico no guia axonal, incluindo o estabelecimento de projeções corticoespinhais, e segrega axônios motores e sensoriais durante a formação de circuitos neuromusculares.
• Além do desenvolvimento, o EPHA4 regula a plasticidade sináptica no cérebro adulto e inibe a regeneração axonal após a lesão. Também contribui para a formação vascular do sistema nervoso central.
• A nível subcelular, o EPHA4 localiza-se na membrana celular, projeções axonais e dendríticas, membranas de densidade pós-sináptica, endossomos precoces e junções de aderência.
• O EPHA4 é expresso de forma ubíqua nos tecidos e participa de diversos eventos de sinalização célula-célula, incluindo o desenvolvimento do epitélio tímico e a separação de células pilares da cóclea. Pode fosforilar CAPRIN1 para promover a formação de compartimentos sem membrana (Por similaridade).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange o domínio extracelular N‑terminal (aa 20–100), portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o receptor de comprimento total e possa detectar fragmentos solúveis ou ectodomínios clivados.
• Em WB em condições redutoras, antecipe uma banda migrando em ~110 kDa em lisados de tecidos ou linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato. Execute controles positivos e negativos apropriados para validação de especificidade.
• Para IF/ICC, o EPHA4 tipicamente exibe coloração de membrana plasmática e projeções neuronais. Use fixação otimizada (por exemplo, PFA a 4%) e permeabilização para preservar a acessibilidade do epítopo e a morfologia.
• Em aplicações de ELISA, o reconhecimento de epítopo extracelular pode ser explorado para ensaios sanduíche ou estudos de competição de ligação de ligantes. Valide o ensaio com proteína EPHA4 recombinante, se disponível.
• Como o EPHA4 é altamente conservado, a reatividade cruzada com outros receptores Eph não pode ser excluída; a identidade das bandas detectadas deve ser confirmada por knockdown de siRNA ou modelos KO, quando possível.

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