Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-EPHA5 para WB, IF/ICC, ELISA - P54756

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de EPHA5

• Receptor de efrina tipo A 5 (EPHA5), também conhecido como EHK-1, EK7 ou TYRO4, é um membro da subfamília de receptores de efrina das receptor tirosina quinases que se ligam a ligantes de efrina-A ancorados em GPI, sendo EFNA5 provavelmente o seu ligante homólogo principal.
• Após a ligação do ligante, EPHA5 medeia a sinalização bidirecional dependente de contato: sinalização direta através do receptor e sinalização reversa através do ligante de efrina, orquestrando processos de desenvolvimento críticos.
• EPHA5 funciona como uma molécula de orientação de axônios, essencial para a formação das vias retinoectal, entorrino-hipocampal e hipocamposseptal durante o desenvolvimento do sistema nervoso.
• No cérebro adulto, EPHA5 contribui para a plasticidade sináptica ao regular a sinaptogênese, destacando o seu papel além do desenvolvimento embrionário.
• Fora do sistema nervoso, a interação entre EPHA5 e EFNA5 medeia a comunicação entre células das ilhotas pancreáticas, regulando a secreção de insulina estimulada pela glicose (Por similaridade).
• Subcelularmente, EPHA5 se localiza na membrana celular e está enriquecido em projeções celulares como axônios e dendritos, o que é consistente com o seu papel na conectividade neuronal.
• A proteína é expressa quase exclusivamente no sistema nervoso, notavelmente em neurônios corticais, células de Purkinje cerebelares e neurônios piramidais, com um gradiente de expressão crescente do prosencéfalo ao rombencéfalo e medula espinhal.
• EPHA5 sofre splicing alternativo e modificações pós-traducionais incluindo glicosilação e fosforilação, características comuns às receptor tirosina quinases que modulam a atividade de sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende a região N-terminal (aminoácidos 1-130) de EPHA5 humana, que inclui o peptídeo sinal e parte do domínio de ligação ao ligante de efrina; este projeto pode fornecer especificidade para a porção extracelular do receptor.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 115 kDa; devido à glicosilação, a banda observada pode aparecer ligeiramente acima. Considere usar lisados de controle positivo de tecido cerebral ou linhas celulares neuronais (ex.: SH-SY5Y) conhecidas por expressar EPHA5.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), é esperado que EPHA5 se localize na membrana celular e dentro de projeções neuronais como axônios e dendritos. Valide os padrões de coloração em neurônios primários cultivados ou linhas celulares neuronais, e inclua controles apropriados para confirmar a especificidade.
• Aplicações de ELISA podem ser usadas para detectar EPHA5 em lisados celulares ou homogenatos de tecido; no entanto, recomenda-se a otimização das condições de revestimento e detecção com base na matriz da amostra.
• Dada a reatividade cruzada com camundongo e rato, este anticorpo é adequado para estudos em modelos de roedores, mas confirme os níveis de expressão no tecido alvo, pois EPHA5 exibe gradientes específicos de região no sistema nervoso.

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