Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-EPS15 para WB, IF/ICC, ELISA - P42566

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EPS15

• A EPS15 (Substrato 15 do receptor do fator de crescimento epidérmico), também conhecida como AF-1p, é uma proteína expressa ubiquamente envolvida na regulação do crescimento celular e da sinalização mitogênica.
• Desempenha um papel crítico na endocitose mediada por clatrina como um adaptador para a montagem de vesículas revestidas de clatrina, facilitando a internalização de receptores tirosina quinases, como o EGFR.
• A EPS15 é necessária para o tráfego pós-Golgi e participa na maturação das vesículas revestidas de clatrina, incluindo a invaginação e o brotamento.
• Também medeia a endocitose da integrina beta-1 (ITGB1) e do receptor de transferrina (TFR), sendo que a internalização da ITGB1 depende da associação com a DAB2.
• Subcelularmente, a EPS15 localiza-se no citoplasma, membrana celular, vesículas revestidas de clatrina e membranas de endossomos iniciais, consistente com seu papel no tráfego endocítico.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e conjugação com ubiquitina, que podem regular sua atividade e interações.
• O gene EPS15 está implicado em rearranjos cromossômicos e atua como um proto-oncogene, destacando sua relevância na biologia do câncer.
• Além disso, a EPS15 está envolvida em interações hospedeiro-vírus, sublinhando sua ampla importância biológica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 660-840 da EPS15 humana, uma região provavelmente exposta e antigênica em condições nativas, tornando este anticorpo adequado para detectar EPS15 endógena em múltiplas aplicações.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 99 kDa; certifique-se de utilizar a porcentagem de gel e as condições de transferência apropriadas.
• Em imunocitoquímica/imunofluorescência (IF/ICC), considere as condições de fixação e permeabilização para preservar a acessibilidade do epítopo, uma vez que a EPS15 se localiza em vesículas revestidas na membrana.
• Valide a reatividade cruzada em amostras de camundongo e rato conforme indicado; realize um experimento de titulação para determinar as diluições de trabalho ideais para seus sistemas de ensaio específicos.
• Observe que anticorpos policlonais podem apresentar variabilidade entre lotes; é aconselhável incluir controles positivos e negativos apropriados em cada experimento.

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