Anticorpo Policlonal Anti-EPS8 para WB, ELISA - Q12929

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EPS8

• EPS8 (Substrato da quinase do receptor do fator de crescimento epidérmico 8) é uma proteína adaptadora de sinalização que regula a dinâmica do citoesqueleto de actina, controlando processos como migração celular e função de células dendríticas. Foi inicialmente identificado como um substrato para a quinase do receptor de EGF.
• A proteína funciona como parte de um complexo trimérico com SOS1 e ABI1 para transduzir sinais de Ras para Rac, ativando a atividade GEF específica de Rac, ligando a sinalização do fator de crescimento ao remodelamento da actina.
• O EPS8 exibe atividades duplas de modulação da actina: tamponamento da extremidade barbante quando ligado à ABI1 (inibindo a motilidade) e empacotamento da actina quando associado à BAIAP2 para promover extensões filopodiais e protrusões de membrana.
• Nos neurônios, o EPS8 regula negativamente a formação de filopódios axonais através do tamponamento da actina; no entanto, a fosforilação induzida por BDNF inibe essa atividade de tamponamento, permitindo o crescimento filopodial.
• Nas pontas dos estereocílios nas células ciliadas, o EPS8 forma um complexo com WHRN e MYO15A que é essencial para o alongamento do núcleo de actina, e mutações no EPS8 estão associadas à surdez não sindrômica (DFNB102).
• Subcelularmente, localiza-se no córtex celular, rufos, cones de crescimento, estereocílios e sinaptossomos, consistente com seus papéis em protrusões de membrana dinâmicas impulsionadas por actina.
• A proteína contém um domínio SH3 e sofre fosforilação e ubiquitinação; a degradação mediada por ubiquitina é necessária durante a fase G2 para mudanças na forma celular associadas à progressão do ciclo celular.
• Expressa amplamente em tecidos, incluindo cérebro, coração, pulmão, fígado, rim e pâncreas, bem como em muitas linhagens celulares epiteliais e fibroblásticas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-200) do EPS8 humano, que inclui parte do domínio SH3 e da região N-terminal. Esta região é relativamente conservada entre humano, camundongo e rato, explicando a reatividade cruzada. Considere o alinhamento de sequências se estiver trabalhando com outras espécies.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é ~92 kDa (com base no UniProt: 91,9 kDa). Bandas podem ser observadas próximas a este tamanho; no entanto, fosforilação ou outras modificações podem causar pequenos desvios. Valide com controles positivos e negativos apropriados.
• Em aplicações de ELISA, utilize proteína EPS8 recombinante bem caracterizada ou lisados celulares de linhagens com expressão conhecida. Como o EPS8 é amplamente expresso, escolha um sistema com níveis de expressão moderados a altos.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência de lote para lote pode variar; considere realizar experimentos piloto ao trocar de lotes, particularmente para ensaios quantitativos.

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