Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ERCC3 para WB, ELISA - P19447

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ERCC3

• A ERCC3 (XPB) é a subunidade de 89 kDa do complexo central do fator de transcrição geral e reparo de DNA IIH (TFIIH), também conhecido como subunidade de 89 kDa do fator de transcrição básico 2 (BTF2 p89).
• Funciona como uma helicase/translocase de DNA 3'-5' dependente de ATP que se liga ao DNA de fita dupla (dsDNA) e o desenrola através da atividade de translocase, em vez da ação clássica de helicase. Referências relacionadas:
  PMID:27193682, PMID:33902107
• Na iniciação da transcrição, a ERCC3 é essencial para a abertura e escape do promotor; sua atividade de helicase dependente de ATP induz e propaga uma torção no DNA para abrir o promotor. Referências relacionadas:
  PMID:10024882, PMID:8157004, PMID:27193682, PMID:33902107
• No reparo por excisão de nucleotídeos (NER), a ERCC3 ajuda a abrir o DNA ao redor das lesões; a atividade de ATPase (mas não a atividade de helicase) é necessária para a fusão inicial do DNA, enquanto a XPA o retém na extremidade 5' de uma bolha de DNA. Referências relacionadas:
  PMID:17466626, PMID:2111438, PMID:31253769
• A ERCC3 está localizada exclusivamente no núcleo.
• Participa em interações hospedeiro-vírus e está ligada a doenças como xeroderma pigmentoso, síndrome de Cockayne e tricotiodistrofia quando mutada.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação; é uma fosfoproteína.
• A proteína tem um peso molecular de 89.278 Da e está envolvida em processos celulares críticos, incluindo regulação da transcrição, reparo de DNA e resposta a danos no DNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde aos aminoácidos 512–782 do ERCC3 humano (NP_000113.1); esta região pode gerar anticorpos que reconhecem tanto a ERCC3 de comprimento total quanto potenciais isoformas.
• Para Western blotting, considere usar extratos nucleares ou lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato; o tamanho da banda previsto é de aproximadamente 89 kDa.
• O ELISA pode ser empregado para quantificar os níveis de ERCC3 ou para triagem, mas otimize as condições de revestimento e detecção para o seu formato de ensaio específico.
• Como a ERCC3 é um componente do complexo TFIIH, experimentos de co-imunoprecipitação podem exigir otimização cuidadosa para manter a integridade do complexo.
• Ao estudar o reparo de DNA ou a transcrição, valide o desempenho do anticorpo em seu sistema de amostra relevante sob condições induzidas ou basais.

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