Anti-ERK1 (MAPK3) Anticorpo Monoclonal para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P27361

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ERK1

• O ERK1, codificado pelo gene MAPK3, é uma cinase serina/treonina que funciona como um componente central da via de transdução de sinal da cinase MAP, mediando diversos processos biológicos, como crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação (PubMed:34497368). Referências relacionadas: PMID:34497368
• Juntamente com o ERK2 (MAPK1), forma um nó chave na cascata MAPK/ERK, que é ativada por uma vasta gama de estímulos extracelulares e leva à fosforilação de numerosos alvos a jusante, incluindo fatores de transcrição, cinases de proteínas e proteínas do citoesqueleto.
• O ERK1 fosforila mais de 160 substratos, como fatores de transcrição (por exemplo, ATF2, BCL6, ELK1, FOS), elementos do citoesqueleto (por exemplo, CANX, MAP2, MAPT), reguladores da apoptose (por exemplo, BAD, CASP9) e reguladores da tradução (por exemplo, EIF4EBP1), regulando assim a expressão génica, a progressão do ciclo celular e o metabolismo (PubMed:35216969). Referências relacionadas: PMID:35216969
• A proteína localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o citoplasma, núcleo, caveolas da membrana, junções celulares e adesões focais, permitindo sinalização dependente do contexto. Após ativação, transloca para o núcleo para fosforilar alvos nucleares, enquanto as suas reservas citosólicas e associadas à membrana regulam processos como tradução, mitose e adesão celular.
• O splicing alternativo do MAPK3 produz isoformas, e a atividade da cinase é controlada pela fosforilação em Thr-202 e Tyr-204 pelo MAP2K1/MEK1, bem como através de interações com proteínas de andaime, fosfatases e direcionamento subcelular.
• Para além da sinalização clássica MAPK, o ERK1 está envolvido na dinâmica endossómica, processamento de lisossomas e fragmentação do aparelho de Golgi durante a mitose, destacando o seu papel na regulação de organelos.
• O ERK1 tem sido implicado em interações hospedeiro-vírus e apoptose, sendo a sua desregulação ligada a vários cancros e distúrbios do desenvolvimento.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético correspondente à região N-terminal (aa 1-100) do ERK1 humano, sugerindo que o anticorpo reconhece um epítopo dentro deste domínio. Para o Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 43 kDa; considere usar um controlo de carga, como GAPDH ou β-actina.
• Ao realizar imunofluorescência (IF/ICC) ou IHC, recomenda-se a permeabilização de células/tecidos para permitir o acesso do anticorpo ao ERK1 intracelular e nuclear. A recuperação de antigénio pode ser necessária para amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina (FFPE).
• Para imunoprecipitação (IP), o anticorpo é adequado para capturar o ERK1 nativo. Experimentos de Co-IP podem ser viáveis se o epítopo estiver exposto em complexos proteicos; no entanto, verifique a co-precipitação de parceiros conhecidos (por exemplo, MEK, RSK) no seu sistema.
• Este anticorpo monoclonal é validado para múltiplas aplicações, mas aconselha-se a otimização da diluição e das condições do tampão, especialmente ao usar espécies não humanas ou não de rato, pois a reatividade cruzada para além das espécies listadas não foi testada.

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