Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ERp29 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30040

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ERp29

• ERp29, também conhecido como ERp28, ERp31, PDIA9 e PDI-DB, é uma proteína residente no retículo endoplasmático (RE) codificada pelo gene ERP29 (C12orf8) em humanos.
• Não exibe atividade de isomerase de dissulfeto, mas desempenha um papel crítico no processamento e dobramento de proteínas secretoras dentro do lúmen do RE.
• ERp29 localiza-se principalmente no lúmen do RE e também foi detectado em melanossomos, indicando envolvimento em vias secretoras e de pigmentação.
• A proteína é expressa de forma ubíqua, com níveis mais altos em tecidos secretores, alinhando-se com sua função proposta na secreção de proteínas.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, e o gene sofre splicing alternativo, gerando múltiplas variantes de transcrito.
• Estudos estruturais (palavra-chave de estrutura 3D no UniProt) resolveram sua organização de domínios, auxiliando na compreensão de suas interações funcionais.
• O peso molecular previsto é de aproximadamente 29 kDa (UniProt: 28993 Da), correspondendo ao peso proteico observado em configurações experimentais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 33–261, cobrindo a proteína madura após a remoção do peptídeo sinal; espera-se que reconheça tanto o ERp29 nativo quanto desnaturado em aplicações como WB e IF/ICC.
• Para Western blot (WB), uma banda próxima a 29 kDa é antecipada; use tampões de lise otimizados para proteínas do lúmen do RE e inclua inibidores de protease/fosfatase.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato induzido por calor) pode melhorar a coloração em tecidos FFPE; valide usando tecidos secretores com expressão conhecidamente alta de ERp29.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), a permeabilização é essencial para acessar o lúmen do RE; a coloração conjunta com marcadores de RE (por exemplo, calnexina) pode confirmar a especificidade da localização.
• Ensaios baseados em ELISA podem ser otimizados usando o imunógeno recombinante como padrão de referência; etapas apropriadas de bloqueio e lavagem devem ser determinadas empiricamente.
• A reatividade cruzada relatada com ERp29 de camundongo e rato (84% e 83% de identidade de sequência, respectivamente) apoia estudos entre espécies; no entanto, a validação no sistema de amostra relevante é recomendada.

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