Anticorpo Policlonal Anti-EXT2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q93063

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EXT2

• Codifica a exostosina-2, uma glicosiltransferase de transmembrana do tipo II que serve como uma subunidade crítica do copolímero de sulfato de heparano (HS); nomes alternativos incluem Glicuronosil-N-acetilglicosaminil-proteoglicano 4-alfa-N-acetilglicosaminiltransferase e Proteína de exostoses múltiplas 2.
• Forma um complexo heterodimérico com EXT1 para constituir a polimerase HS ativa; juntos, eles catalisam o alongamento processivo da espinha dorsal do HS pela adição alternada de resíduos de ácido D-glucurônico (GlcA) e N-acetil-D-glicosamina (GlcNAc) de seus respectivos doadores de açúcar UDP. Referências relacionadas: PMID:22660413, PMID:36402845, PMID:36593275
• A subunidade EXT1 fornece a atividade glicuronosiltransferase, enquanto o EXT2 é responsável pela atividade N-acetilglicosaminiltransferase; ambos são necessários para a função completa da polimerase e para a síntese da cadeia de HS. Referências relacionadas: PMID:36402845, PMID:36593275
• Os proteoglicanos de sulfato de heparano resultantes são componentes onipresentes da matriz extracelular e das superfícies celulares, desempenhando papéis essenciais na homeostase tecidual, sinalização de fatores de crescimento e adesão celular. Referências relacionadas: PMID:19344451, PMID:22660413
• Localiza-se principalmente à membrana do aparelho de Golgi, com presença na rede cis-Golgi e na membrana do retículo endoplasmático; uma forma secretada também foi relatada.
• Amplamente expresso em tecidos.
• Mutações no EXT2 estão associadas a exostoses múltiplas hereditárias, um distúrbio autossômico dominante caracterizado por crescimentos ósseos com capa de cartilagem; a proteína também é classificada como um supressor de tumor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 80–340) abrange o domínio catalítico do EXT2; o anticorpo policlonal resultante deve reconhecer múltiplos epítopos dentro desta região, fornecendo detecção robusta para Western blot desnaturante e aplicações nativas como IF/ICC.
• Para Western blot, considere uma faixa de diluição do anticorpo primário de 1:500–1:2000 e valide contra o peso molecular previsto de ~82 kDa; a inclusão de controles apropriados (por exemplo, lisatos com superexpressão de EXT2 ou amostras tratadas com siRNA) é recomendada.
• Em imunofluorescência/ICC, o EXT2 normalmente exibe um padrão de colorização perinuclear tipo Golgi; a permeabilização da membrana com 0,1% de Triton X-100 pode melhorar a acessibilidade preservando a morfologia do orgânulo.
• O desempenho em ELISA é suportado pelo imunógeno de proteína recombinante; considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção em configurações de ELISA sanduíche para pesquisa de biomarcadores relacionados ao HS.
• A reatividade cruzada com EXT2 de camundongo e rato foi demonstrada, permitindo o uso em modelos roedores; no entanto, é aconselhável verificar a especificidade na espécie e tecido relevantes antes de estudos em grande escala.

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