Anticorpo monoclonal de coelho anti-FAP (proteína de ativação de fibroblastos-α) para WB, IF/ICC, ELISA - Q12884

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da FAP

• A FAP é uma protease serina multifuncional da superfície celular, também conhecida como seprase, que apresenta atividades de endopeptidase pós-prolil e dipeptidil peptidase, com preferência pela clivagem de substratos após resíduos de prolina. Referências relacionadas: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248.
• Ela degrada a gelatina e o colágeno tipo I desnaturado pelo calor, contribuindo para o remodelamento da matriz extracelular (MEC) durante processos como cicatrização de feridas, fibrose e invasão tumoral. Referências relacionadas: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466.
• A FAP possui atividade de dipeptidil peptidase, clivando dipeptídeos N-terminais após a prolina, e pode processar o neuropeptídeo Y, o peptídeo YY, a substância P e o BNP32 como substratos naturais. Referências relacionadas: PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817.
• Localizada na superfície celular, particularmente em lamelipódios, invadopódios e estruturas enrugadas, a FAP também é secretada e encontrada no citoplasma, facilitando a proteólise pericelular local.
• Ela é altamente expressa em fibroblastos estromais reativos de cânceres epiteliais, tecido de granulação, miofibroblastos do fígado cirrótico e células de glioma, mas está ausente nos tecidos adultos normais, tornando-se um marcador de fibroblastos ativados em condições patológicas.
• A FAP promove o crescimento tumoral ao intensificar a angiogênese, degradar fibras de colágeno, suprimir as respostas antitumorais das células imunes e modular a apoptose, ao mesmo tempo que, paradoxalmente, atua como supressora tumoral em células melanocíticas de maneira independente da atividade proteolítica.
• Como uma glicoproteína com peso molecular previsto de aproximadamente 88 kDa (comprimento total), a FAP inclui isoformas resultantes de splicing alternativo e é membro da família das proteases serina prolil oligopeptidases.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange o domínio catalítico (aa 411–510), sugerindo que o anticorpo pode detectar tanto as formas de FAP ligadas à membrana quanto as solúveis; confirme no sistema de amostra relevante.
• Para western blotting, espere bandas em aproximadamente 87 kDa (comprimento total) e possivelmente 26 kDa (isoforma resultante de splicing alternativo ou produto de clivagem); utilize controles de carregamento e marcadores de peso molecular apropriados.
• Em aplicações de IF/ICC, espera-se sinal nas projeções da superfície celular (lamelipódios, invadopódios); considere a permeabilização para aumentar a acessibilidade aos epítopos intracelulares.
• Foi relatada reatividade cruzada com camundongo e rato; valide os padrões de coloração em fibroblastos ativados ou linhagens de células tumorais dessas espécies.
• Para ELISA, a proteína FAP humana recombinante ou lisados celulares de linhagens que expressam FAP podem servir como reagentes de captura; combine-os com um anticorpo de detecção compatível caso esteja desenvolvendo um ensaio sanduíche.

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