Anticorpo Monoclonal Anti-FAP para Citometria de Fluxo - Q12884

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da FAP

• A endopeptidase prolil FAP (proteína alfa de ativação de fibroblastos, também conhecida como seprase) é uma protease serina glicoproteica de superfície celular envolvida na degradação da matriz extracelular (MEC), contribuindo para o remodelamento tecidual, fibrose, cicatrização de feridas, inflamação e crescimento tumoral. Apresenta atividade de endopeptidase com clivagem após prolina, com preferência por sequências consenso Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala em substratos como SERPINF2 e SPRY2. Referências relacionadas: PMID:14751930 PMID:16223769 PMID:16410248

• A FAP degrada a gelatina e o colágeno tipo I desnaturado pelo calor, mas não os colágenos nativos tipos I e IV, a vitronectina, a tenascina, a laminina, a fibronectina, a fibrina ou a caseína. Referências relacionadas: PMID:10347120 PMID:10455171 PMID:12376466

• A enzima também possui atividade de dipeptidil peptidase, clivando dipeptídeos N-terminais nos quais o resíduo penúltimo é prolina, com preferência por Ala-Pro, Ile-Pro, Gly-Pro, Arg-Pro e Pro-Pro. Referências relacionadas: PMID:10347120 PMID:10593948 PMID:16175601

• Os substratos naturais da atividade de dipeptidil peptidase incluem o neuropeptídeo Y, o peptídeo YY, a substância P e o peptídeo natriurético cerebral 32. Referências relacionadas: PMID:21314817

• A forma da FAP presente na membrana plasmática, em associação com DPP4, PLAUR ou integrinas, promove a proteólise pericelular, a adesão celular, a migração e a invasão, intensificando, assim, a progressão tumoral, a angiogênese e a evasão imune.

• A FAP está localizada na superfície celular, na membrana, nos lamelipódios, nos invadopódios e nas ondulações da membrana, sendo também secretada e encontrada no citoplasma. É altamente expressa em fibroblastos ativados de feridas em cicatrização, estroma tumoral, fígado cirrótico e tecido adiposo, com expressão específica de isoformas em células de melanoma, carcinoma e linhagens de fibroblastos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração para o seu tipo específico de célula e condições experimentais.
• O imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 26-760); portanto, o anticorpo pode detectar tanto a FAP ligada à membrana quanto a FAP solúvel. Valide a especificidade da detecção no seu sistema de ensaio.
• Utilize controles de isotipo apropriados e fixe/permeabilize as células se a coloração intracelular for necessária.
• Valide o desempenho do anticorpo em amostras humanas relevantes (por exemplo, fibroblastos ativados e linhagens de células tumorais), pois a reatividade cruzada é limitada a humanos.

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